鈣含量檢測：鈣比色檢測試劑盒解決方案

鈣對于所有生物來說都是 不可少的，因?yàn)殁}離子在生物體內(nèi)被吸收并釋放到生物體內(nèi)細(xì)胞質(zhì)外信號是許多細(xì)胞過程的信號。99%的鈣是鈣在骨骼和牙齒中發(fā)現(xiàn)，其余1%在血液和軟組織中發(fā)現(xiàn)。血清鈣水平受到嚴(yán)格控制（8.4-11.4 mg/dL），超出此范圍的任何變化都可能導(dǎo)致死亡有嚴(yán)重影響。鈣在調(diào)節(jié)血管收縮和舒張中起作用血管、神經(jīng)沖動(dòng)傳遞、肌肉收縮和激素分泌。

鈣離子通道控制鈣離子在細(xì)胞膜上的遷移，允許激活和抑制多種酶。低鈣的原因這些水平包括慢性腎功能衰竭、維生素D缺乏和低血鎂水平這可能發(fā)生在嚴(yán)重的酒精中毒。BioVision的比色鈣測定試劑盒利用鈣離子與0-甲酚酞形成的顯色絡(luò)合物（λ=575nm），以在生理上重要的鈣濃度0.4范圍內(nèi)提供一種簡單的測定方法-100毫克/分升（0.1-25毫米）。

艾美捷 BioVision 鈣比色法檢測試劑盒利用鈣離子和O-苯酞酚形成的顯色復(fù)合物（λ = 575 nm）的原理，使用O-苯酞酚與樣本中的鈣離子反應(yīng)后通過比色計(jì)或分光光度計(jì)實(shí)現(xiàn)定量.

鈣含量比色檢測試劑盒測定方案：

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：通過添加10%的鈣，將鈣標(biāo)準(zhǔn)稀釋至5 mM（20 mg/dL）將500 mM標(biāo)準(zhǔn)溶液的µl與990µl dH2O充分混合。將0,2,4,6,8,10µl添加到一系列溶液中每孔提供0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0µg鈣。將體積增加到50µl，并使用二氧化二氫。

2.樣品制備：血清或尿液樣品可直接用于本試驗(yàn)。放置10微升在96孔板中的孔中取樣。對于其他液體樣品，將2–50µl樣品添加到溶液中個(gè)人井。用dH2O使總體積達(dá)到50µl。樣品可以化驗(yàn)沒有任何事先治療。一些MRI造影劑會(huì)在這種情況下引起短暫的干擾化驗(yàn)

3.補(bǔ)充：

A） 將90µl顯色試劑添加到每個(gè)含有標(biāo)準(zhǔn)品、樣品或試劑的孔中控制并輕輕混合。

B） 向每個(gè)孔中添加60µl鈣分析緩沖液并輕輕混合。

4.在室溫下培養(yǎng)反應(yīng)5-10分鐘。避光。

5.在575 nm處測量外徑。發(fā)色團(tuán)是不穩(wěn)定的，隨著時(shí)間的推移會(huì)稍微褪色，所以在30分鐘內(nèi)閱讀標(biāo)準(zhǔn)品和樣品。

6.計(jì)算：通過減去從0計(jì)算得出的值來校正背景所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)讀數(shù)的控制（注：背景讀數(shù)可能為重要，必須從樣本讀數(shù)中減去）。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線µg/井vs。外徑575納米讀數(shù)。然后將樣本讀數(shù)應(yīng)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線，以獲得井中的鈣樣本量（Sa）。試樣中的鈣濃度：C=Sa/Sv（微克/微升或毫克/毫升）式中：Sa是標(biāo)準(zhǔn)曲線中的鈣樣品量（單位：µg）。Sv是添加到樣品孔中的樣品體積（µl）。鈣分子量：40。樣品中的鈣濃度可以表示為mg/ml、mg/dL或mM（mmol/升）。1毫克/毫升=100毫克/分升；1毫米=4毫克/分升

圖：（a） 標(biāo)準(zhǔn)曲線。（b） 從匯集的人血清（10μl，1:1稀釋）和混合人類尿液（10μl，1:1稀釋）。試驗(yàn)在試驗(yàn)結(jié)束后進(jìn)行工具包協(xié)議。