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當(dāng)前位置:武漢艾美捷科技有限公司>>技術(shù)文章>>西部轉(zhuǎn)移丨G-Biosciences 三部曲全方案
蛋白質(zhì)印跡法或蛋白質(zhì)印跡法涉及將蛋白質(zhì)從聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到 PVDF 或硝酸纖維素膜上,以便通過特異性抗體進(jìn)行檢測。艾美捷 G-Biosciences 為整個 Western 轉(zhuǎn)移過程提供高質(zhì)量的試劑和資源,以確保成功轉(zhuǎn)移和清潔蛋白質(zhì)檢測。
部曲:蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移
對于初始轉(zhuǎn)移,艾美捷 G-Biosciences 具有高蛋白結(jié)合膜(聚偏氟乙烯和硝酸纖維素) 和高效率西部轉(zhuǎn)移緩沖液,包括專為高分子量蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移. 蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移后,強(qiáng)烈建議使用快速且可逆的蛋白質(zhì)染色劑檢查蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移效率,例如Swift™ 膜染色劑或者BLOT-FastStain™. 對于改進(jìn)的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移或難以轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì),例如高分子量蛋白質(zhì),G-Biosciences西部轉(zhuǎn)移墊以提高傳輸效率。
第二部曲:蛋白質(zhì)印跡
對于探測蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移膜,步是用適當(dāng)?shù)姆忾]劑封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)。G-Biosciences 提供一整套封閉劑,包括非動物蛋白阻斷劑(午睡阻隔™或者Protein-Free™ 封閉劑)、非血清動物蛋白阻斷劑(Superior™ 封閉劑或者FISH-Blocker™, 和標(biāo)準(zhǔn)阻塞解決方案使用牛奶,酪蛋白或者牛血清白蛋白. 一個方便封閉劑試用包提供以確定要使用的J佳封閉劑。
一旦膜被封閉,就會添加選擇的一抗。G-Biosciences 提供超過 21,000 種一抗所有這些都可以直接與 HRP 或其他檢測探針結(jié)合?;蛘?,一個二抗偶聯(lián)辣根過氧化物酶 (HRP) 或堿性磷酸酶 (AP) 可用于檢測一抗。一抗和二抗孵育后,需要用洗滌緩沖液*清洗膜(TBS-Tween 或 PBS-Tween)。
第三部曲:蛋白質(zhì)檢測
最后一步是蛋白質(zhì)檢測,檢測探針通過化學(xué)發(fā)光或者顯色反應(yīng)。G-Biosciences femtoLUCENT™ PLUS和picoLUCENT™ PLUS是 HRP 和 AP 的高靈敏度化學(xué)發(fā)光試劑,而femtoCHROMO™-AP和femtoCHROMO™-HRP允許對蛋白質(zhì)進(jìn)行顯色檢測。
艾美捷 G-Biosciences Western ReProbe™允許用戶剝離印跡并用不同的抗體重新探測,例如管家抗體,以及Swift™ 薄膜清潔劑有助于清潔斑點(diǎn)和曝光過度的膠片。
G-Biosciences專注于蛋白質(zhì)組學(xué)研究,廣泛應(yīng)用于學(xué)術(shù)研究和工業(yè)制造領(lǐng)域,包括:蛋白質(zhì)檢測、樣品制備、電泳、蛋白質(zhì)印跡、質(zhì)譜、測定開發(fā)、抗體生產(chǎn)和蛋白質(zhì)純化等。艾美捷科技是G-Biosciences的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。
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