Nanoprobes納米探針丨Nanogold偶聯(lián)物的特點(diǎn)和應(yīng)用

艾美捷 Nanoprobes Nanogold®-抗體和鏈霉親和素偶聯(lián)物：

1.4 nm Nanogold® 二抗和鏈霉親和素偶聯(lián)物

用于 EM、LM、印跡和診斷。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold偶聯(lián)物的特點(diǎn)：

1.最小的市售金免疫探針。

2.穿透并到達(dá)其他探針無法觸及的抗原：經(jīng)證實(shí)可穿透高達(dá) 40 µm 的細(xì)胞和組織切片。

3.J其均勻的 1.4 nm 直徑金標(biāo)簽。

4.提供 Fab'、IgG 和鏈霉親和素偶聯(lián)物。

5.接近 1 個(gè) Nanogold® 粒子到 1 個(gè) Fab'（或 IgG）。

6.低非特異性親和力產(chǎn)生最小的背景。

7.銀增強(qiáng)的超靈敏性：免疫印跡上抗原檢測(cè)量為 0.1 pg。

8.金與遠(yuǎn)離抗原結(jié)合區(qū)域的抗體共價(jià)連接。

9.高穩(wěn)定性和長保質(zhì)期：結(jié)合物在儲(chǔ)存一年后反應(yīng)性不變。

10.在廣泛的 pH 值和離子強(qiáng)度范圍內(nèi)穩(wěn)定。

艾美捷 Nanoprobes Nanogold偶聯(lián)物的應(yīng)用：

1.新的用于 EM 的蛋白質(zhì)融合標(biāo)簽的金標(biāo)記

2.超薄冷凍切片的 EM，

參見：Takizawa, T. 和 Robinson, JM；J. Histochem Cytochem., 42 , 1615-1623 (1994))。[其他參考]。

3.預(yù)嵌入電子顯微鏡。[參考資料]

4.嵌入后電子顯微鏡（對(duì)于嵌入前和嵌入后的方法，

參見：Nusser, Z. 等人：J. Neuroscience, 15 , 2948-2960 (1995)）。[其他參考]

5.相關(guān)電子和光/共焦顯微術(shù)（參見：Sun, XJ, et al.: J. Histochem. Cytochem., 43 , 329-35 (1995)）。

6.原位雜交檢測(cè)。[參考資料]

7.掃描電子顯微鏡（參見：Hermann, R. 等人：Histochem. Cell Biol., 106 , 31-39 (1996)）。

案例1：原位雜交應(yīng)用：

Nanogold® 探針的小尺寸及其對(duì)核抗原的訪問能力，加上銀增強(qiáng)獲得的高靈敏度，使其成為超靈敏的特定 DNA 序列原位雜交檢測(cè)的專業(yè)試劑，無論有無原位 PCR。使用生物素化酪胺（催化報(bào)告分子沉積或 CARD，也稱為酪胺信號(hào)放大或 TSA）放大目標(biāo)信號(hào)獲得了驚人的結(jié)果：使用 Nanogold®-鏈霉親和素和銀增強(qiáng)檢測(cè)產(chǎn)品，即使在細(xì)胞中也能產(chǎn)生清晰的信號(hào)僅具有一個(gè)或兩個(gè)拷貝的靶基因，在 RNA 檢測(cè)中可以看到類似的靈敏度（參見：Zehbe, I. 等人：是。J. Pathol., 150 , 1553-1561 (1997))。

優(yōu)點(diǎn)：

比 NBT-BCIP 堿性磷酸酶或過氧化物酶與標(biāo)記擴(kuò)增結(jié)合用于單基因拷貝分辨率更敏感。

大多數(shù)情況下不需要更冗長的 PCR 程序：避免因錯(cuò)誤引發(fā)和擴(kuò)增子擴(kuò)散而導(dǎo)致的假陽性。

用標(biāo)準(zhǔn)明場顯微鏡很容易看到黑色。不需要昂貴的熒光光學(xué)元件，也沒有自發(fā)熒光或漂白問題。

黑色信號(hào)顏色與全強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞和核染色劑（H & E、核固紅、甲基綠）兼容。

也可用于 EM 研究的高空間分辨率信號(hào)。

案例2：電子顯微鏡：

Nanogold® 偶聯(lián)物很容易擴(kuò)散到幾十微米的組織、透化細(xì)胞和細(xì)胞核中，而大多數(shù)膠體金探針很難在這些地方擴(kuò)散。染色更具化學(xué)計(jì)量性，背景較低。盡管 1.4 nm Nanogold® 顆粒在 50-120 kX 放大倍率下直接可見，即使在 80 nm 切片中（在其他未染色的樣品中），在使用銀顯影劑（LI Silver 或 HQ）進(jìn)行短暫（1-5 分鐘）增強(qiáng)后更容易觀察到銀）。即使用醋酸鈾、鋨或檸檬酸鉛染色，在較低放大倍率下也很容易看到產(chǎn)生的 2 至 100 nm 銀顆粒（大小取決于顯影時(shí)間）。

案例3：光和共聚焦顯微鏡：

Nanogold® 探針對(duì)透化細(xì)胞和細(xì)胞核具有出色的穿透力，與免疫熒光探針相似，遠(yuǎn)優(yōu)于膠體金探針。Nanogold®-Fab' 探針比免疫熒光 IgG 標(biāo)記小。Nanogold® 探針不會(huì)發(fā)生聚集，而且由于 Nanogold® 與共價(jià)生物分子共價(jià)連接，因此它們非常穩(wěn)定。隨后短暫（5-15 分鐘）銀增強(qiáng)（LI Silver）即使在普通明場光學(xué)顯微鏡（不需要紫外光學(xué)）中也能發(fā)出可見信號(hào)，其靈敏度通常優(yōu)于熒光。由于相同的 Nanogold® 探針也可用于 EM，因此可以在光學(xué)顯微鏡或共聚焦顯微鏡下進(jìn)行初步染色，同時(shí)可以在超微結(jié)構(gòu) EM 水平上檢查平行樣品。這種靈活性不適用于熒光探針。Nanogold® 現(xiàn)在可與鏈霉親和素和抗生物素 Fab' 結(jié)合用于核酸檢測(cè)。

Nanoprobes專注于免疫金標(biāo)記和免疫測(cè)定試驗(yàn)領(lǐng)域，為廣大科研機(jī)構(gòu)提供用于檢測(cè)生物分子的靈敏的試劑和技術(shù)。艾美捷科技是Nanoprobes的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。