艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒作用盒原理分析

在mRNA疫苗生產(chǎn)過程中，需要通過T7 RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄（IVT, In Vitro Transcription）制備mRNA，在這一過程中會產(chǎn)生雙鏈RNA（dsRNA, double-stranded RNA）等副產(chǎn)物，dsRNA除了會觸發(fā)機體的天然免疫反應(yīng)，還可能導(dǎo)致mRNA發(fā)生降解。所以dsRNA的殘留量是mRNA藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性，IVT制備mRNA時，需對殘留的dsRNA進(jìn)行檢測和去除，以獲得免疫原性較低的功能性mRNA，同時提高mRNA表達(dá)水平。  

因此，雙鏈RNA (dsRNA) 抗體及ELISA試劑盒常被應(yīng)用于mRNA產(chǎn)品的質(zhì)控環(huán)節(jié)。dsRNA抗體包括J2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J2)，J5單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J5)，K1單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K1)和K2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K2)，其中J2抗體是dsRNA檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。J2抗dsRNA IgG2a單克隆抗體已成為dsRNA檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。它最初用于植物病毒的研究，但自從Weber等人在2006年的開創(chuàng)性論文發(fā)表以來，J2被用來證明所有正鏈RNA病毒在感染的細(xì)胞中產(chǎn)生的大量dsRNA，這種抗體已廣泛用于各種系統(tǒng)，有超過200多篇引用文獻(xiàn)。J2可用于檢測多種病毒的dsRNA中間體，如丙型肝炎病毒、登革熱病毒、鼻病毒、基孔肯雅病毒、狂犬病病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、豬瘟病毒、雀麥花葉病毒以及更多存在于培養(yǎng)細(xì)胞和固定石蠟包埋的組織學(xué)樣品中的病毒dsRNA。

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒，利用雙抗夾心ELISA原理，檢測核酸提取物中的病毒dsRNA或非病毒來源的天然或合成的dsRNA，以及檢測人工合成(m)RNA制劑中的dsRNA雜質(zhì)。  

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒原理：

基于使用兩種雙鏈 RNA (dsRNA) 特異性單克隆抗體，dsRNA 檢測試劑盒可以靈敏和選擇性地檢測 dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。檢測具有高度特異性：在存在 1.000-10.000 倍過量其他核酸的情況下，可以檢測核酸提取物中的dsRNA。該測定基于雙抗夾心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠單克隆抗體作為捕獲抗體，單克隆抗體 K2 (IgM) 用作檢測抗體。

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒相關(guān)研究：

MBS574013   Mouse anti double-stranded RNA (J2)   0.2mg

MBS574015   Mouse anti double-stranded RNA (K1)   0.2mg

MBS574017   Mouse anti double-stranded RNA (K2)   5ml

MBS574019   Mouse anti double-stranded RNA (J5)   0.2mg

MBS574021   Mouse anti double-stranded RNA (J2, J5 and K1) Comparison Kit   3x0.1mg