艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒組分及原理分析

雙鏈RNA (dsRNA) 抗體及ELISA試劑盒常被應(yīng)用于mRNA產(chǎn)品的質(zhì)控環(huán)節(jié)。dsRNA抗體包括J2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J2)，J5單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb J5)，K1單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K1)和K2單克隆抗體(Anti-dsRNA mAb K2)，其中J2抗體是dsRNA檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。J2抗dsRNA IgG2a單克隆抗體已成為dsRNA檢測(cè)的J標(biāo)準(zhǔn)。

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒使用的兩種dsRNA抗體如下：

雌性DBA/2小鼠腹腔注射50ug L-dsRNA

和75ug甲基化牛血清白蛋白的混合物，在完-全弗氏佐劑中乳化。

在幾次增強(qiáng)后，將脾細(xì)胞與Sp2/0-Agl4骨髓瘤細(xì)胞融合以產(chǎn)生雜交瘤克隆J2和K2。

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒包含以下試劑，用于200次測(cè)試（2x96孔）：

試劑01：1小瓶包衣抗體（儲(chǔ)存于-20℃

試劑A：1小瓶142 bp dsRNA作為陽(yáng)性對(duì)照（儲(chǔ)存于-20℃）

試劑B：1小瓶dsRNA特異性檢測(cè)抗體（在RPMI+5%FBS中，儲(chǔ)存在+4℃或最好是-20℃）

試劑C：1小瓶HRP綴合的F（ab’）2山羊抗小鼠二級(jí)抗體片段（儲(chǔ)存于+4℃或-20℃）

試劑D：1小瓶TMB底物溶液（儲(chǔ)存于+4℃，避光

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒原理：

基于使用兩種雙鏈 RNA (dsRNA) 特異性單克隆抗體，dsRNA 檢測(cè)試劑盒可以靈敏和選擇性地檢測(cè) dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。檢測(cè)具有高度特異性：在存在 1.000-10.000 倍過量其他核酸的情況下，可以檢測(cè)核酸提取物中的dsRNA。該測(cè)定基于雙抗夾心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠單克隆抗體作為捕獲抗體，單克隆抗體 K2 (IgM) 用作檢測(cè)抗體。

艾美捷雙鏈RNA定量試劑盒原理：

基于使用兩種雙鏈 RNA (dsRNA) 特異性單克隆抗體，dsRNA 檢測(cè)試劑盒可以靈敏和選擇性地檢測(cè) dsRNA 分子（大于 30-40 bp），而不受其核苷酸組成和序列的影響。檢測(cè)具有高度特異性：在存在 1.000-10.000 倍過量其他核酸的情況下，可以檢測(cè)核酸提取物中的dsRNA。該測(cè)定基于雙抗夾心ELISA原理，使用 J2 (IgG2a) 小鼠單克隆抗體作為捕獲抗體，單克隆抗體 K2 (IgM) 用作檢測(cè)抗體。