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Jackson ImmunoResearch封閉血清相關(guān)推薦

時(shí)間:2024/11/8閱讀:105
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關(guān)于IF實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生背景的原因及降低背景的常用方法:

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IF降低背景:

高背景是免疫熒光常見的問題,解決此問題可以用二抗來源的正常血清代替 BSA 做封閉液,降低抗體濃度,增加洗滌次數(shù),洗滌至少三次,每次五分鐘,推薦洗滌液為 PBS+0.05% Tween。

我們實(shí)驗(yàn)室之前大多數(shù)都是使用BSA進(jìn)行封閉,用正常血清代替BSA進(jìn)行封閉倒是第一次聽說,血清真的有如此奇效,迫不及待的趕緊去嘗試了一番,熒光背景確實(shí)顯著降低了。

 

血清作為封閉劑的原理:

強(qiáng)烈建議在PBS中稀釋至5%(v / v)的正常血清作為封閉劑,以減少免疫反應(yīng)中非特異性,保守序列和/Fc受體結(jié)合的背景。用稀釋的正常血清與標(biāo)記抗體來自同一宿主,可獲得最佳結(jié)果,作為添加一級抗體之前的單獨(dú)孵育步驟。

 

用血清進(jìn)行封閉效果好嗎?

封閉血清適用于免疫組化或者免疫熒光實(shí)驗(yàn)中樣本的封閉,可以封閉待檢樣本中與蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的位點(diǎn),另外還可以封閉樣品中內(nèi)源性的Fc片段結(jié)合位點(diǎn),阻斷抗體與樣品中的Fc受體結(jié)合,從而降低背景,減少假陽性。對于適用多抗的實(shí)驗(yàn),選擇二抗種屬來源的正常血清是封閉處理的金標(biāo)準(zhǔn)。

 

封閉血清如何使用?

推薦用PBS將封閉血清原液稀釋5-20倍,配成5%-20%的工作液,直接滴加在組織切片或者細(xì)胞涂片上,37℃度孵育10-30min(或者室溫1h),清除血清,不用洗滌,滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗工作液,37℃孵育1-2h4℃過夜。

 

艾美Jackson ImmunoResearch 封閉血清推薦:

產(chǎn)品名稱 貨號 規(guī)格

Normal Donkey Serum(驢) 017-000-121 10 ml

Normal Alpaca Serum(羊駝) 028-000-121 10 ml

Normal Bovine Serum(牛) 001-000-121 10 ml

Normal Cat Serum(貓) 002-000-120 5 ml

Normal Chicken Serum(雞) 003-000-120 5 ml

Normal Dog Serum(狗) 004-000-120 5 ml

Normal Goat Serum(山羊) 005-000-121 10 ml

Normal Syrian Hamster Serum(敘利亞倉鼠) 007-000-120 5 ml

Normal Horse Serum(馬) 008-000-121 10 ml

Normal Human Serum(人) 009-000-121 10 ml

Normal Mouse Serum(小鼠) 015-000-120 5 ml

Normal Rabbit Serum(兔) 011-000-120 5 ml

Normal Rat Serum(大鼠) 012-000-120 5 ml

Normal Sheep Serum(綿羊) 013-000-121 10 ml

Normal Swine Serum(豬) 014-000-121 10 ml

 

艾美捷科技是Jackson ImmunoResearch的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。


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