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細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)染方法和步驟
閱讀:12151 發(fā)布時(shí)間:2018-9-27 一、貼壁細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)約為1×105 個(gè),
2.第二天,待細(xì)胞貼壁后,換液,
3.加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
4.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
5.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
6.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細(xì)胞生長情況,中途可以換液,保持細(xì)胞的活性,
7.當(dāng)細(xì)胞長滿板底后,傳代至T25培養(yǎng)瓶中。
二、懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細(xì)胞接種6孔板,每孔細(xì)胞數(shù)約為3×105 個(gè),
2.第二天,換液后加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
3.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
4.12h后觀察細(xì)胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
5.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細(xì)胞生長情況,中途可以換液,保持細(xì)胞的活性。