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ELISA試劑盒如何做好標準曲線
閱讀:1222 發(fā)布時間:2018-10-24若要給美好人生一個定義,那就是愜意。若要給愜意一個定義,那就是三五知己、談笑風生。若要給上海雅吉生物公司一個定義,那就是科研朋友們的買ELISA試劑盒的*。
周老師是蘇州大學在校研究生,老師在我司買了相應的抗體自己包被ELISA試劑盒。也是剛剛接觸ELISA實驗的新手,研究大鼠白介素相關指標的實驗,做完大鼠白介素5ELISA實驗后反應標準曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時候梯度還算明顯,但是顯色比較淺,隨著時間延長(大概6、7分鐘)以后梯度就不明顯了。終止反應后測得的值梯度就沒有了。特咨詢我司技術幫忙分析原因所在。我司技術分析:
1、剛加完顯色劑時梯度明顯:顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。
2、酶濃度太高,導致后顯色結果都是高的
3、包被-酶標系統(tǒng)不匹配或者酶標的非特異反應太強,或者酶標儀讀數(shù)范圍不夠,
4、樣本中有能夠催化底物的物質,沒洗下來。
5、建議:包被、酶標重新做梯度,先用較低的濃度把梯度摸索好,然后再優(yōu)化靈敏度,后調出所需的靈敏度、線性范圍
6、有條件的話,可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學發(fā)光上,加完底物三分鐘讀數(shù)。
7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話,顯色十分鐘就差不多了。
8、酶是自己標的這種情況的,HRP比例不要太高。
上海雅吉生物一直秉著以質量求生存,以信譽求發(fā)展的精神,精益求精,力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國內科研事業(yè)單位以及高校等提供的產品服務!本公司ELISA試劑盒具有質量可靠,靈敏度好,更具有免費代測及技術指導服務,歡迎科研者來電詳詢!