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技術文章

肥大細胞染色實驗

閱讀:839          發(fā)布時間:2019-2-21

實驗方法原理    
肥大細胞形態(tài)較大(20~30 μm),細胞核較小,細胞質內充滿許多的圓形嗜堿性顆粒。由于顆粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也屬于硫酸黏多糖類,能夠被異染性染料著色,常用甲苯胺藍染色法。
實驗材料    石蠟組織切片
試劑、試劑盒    二甲苯無水乙醇中性樹膠蒸餾水冰醋酸甲苯胺藍
儀器、耗材    滴管
實驗步驟    
甲苯胺藍染色液:甲苯胺藍 0.5 g,蒸餾水 100 ml。

冰醋酸分化液:冰醋酸 0.5 ml,蒸餾水 100 ml。

1. 石蠟組織切片 4 μm,脫蠟至水。

2. 甲苯胺藍染色液染色 10 min,蒸餾水洗 2 次。

3. 冰醋酸分化液 30 s 左右,至顆粒清晰為止(顯微鏡控制)。

4. 蒸餾水洗 2 次,無水乙醇快速脫水。

5. 過濾紙吸干,二甲苯透明和中性樹膠封固。
收起 
注意事項    
1. 甲苯胺藍液著色力較強,根據不同的組織,可適當縮短染色時間。

2. 冰醋酸分化液作用后,必要時用顯微鏡的高倍鏡進行觀察

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