規(guī)格：100管/96樣
植物木質(zhì)素（Lignin）分光光度法含量試劑盒說(shuō)明書
注意：正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一，是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì)，存在于木質(zhì)組織中，主要作用是通過(guò)形成交織網(wǎng)來(lái)硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素主要位于纖維素纖維之間，起抗壓作
用。
測(cè)定原理
木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?；笤?280nm 處有特征吸收峰，280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素含量正相關(guān)。
需自備的儀器和用品
天平、40 目篩，玻璃試管、燒杯、離心機(jī)，恒溫水浴鍋、烘箱、封口膜、紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿、高氯酸。
植物木質(zhì)素（Lignin）分光光度法試劑盒試劑組成和配制
試劑一：液體 50mL×2 瓶，4℃保存。
試劑二：液體 50mL×2 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 100mL×2 瓶，4℃保存。
樣品處理
樣品 80℃烘干至恒重，粉碎，過(guò) 40 目篩，稱取約 5mg（記為 W）于 10mL 玻璃試管中（務(wù)*玻璃試管，不可用 Ep 管）
測(cè)定操作表

	空白管	測(cè)定管
樣本（mg）		5
試劑一（μL）	1000	1000
高氯酸（μL）	40	40
于 10mL 玻璃試管中，用封口膜密封，充分混勻，80℃水浴 40min，每隔 10min 震 蕩一次，然后自然冷卻
試劑二（μL）	1000	1000
充分混勻
上清（μL）	40	40
試劑三（μL）	1960（參照注意事項(xiàng)四）	1960（參照注意事項(xiàng)四）
取 200ul 于微量石英比色皿或者96孔板，測(cè)定 280nm處吸光值 A。分別記為 A 空白管和 A 測(cè)定管，ΔA=A 測(cè)定管-A 空白管

植物木質(zhì)素（Lignin）分光光度法試劑盒計(jì)算公式
用微量石英比色皿計(jì)算公式如下：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.02776x+0.0068，R² =0.9889
Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0068)÷0.02776×V 反總×10 ^-3 ÷W×T
=0.0735×(ΔA-0.0068) ÷W×T
V 反總：反應(yīng)總體積：2.04mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)
 

用 96 孔板計(jì)算公式如下：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.01388x+0.0034，R² =0.9889
Lignin（mg/g 干重）= (ΔA-0.0034)÷0.01388×V 反總×10 ^-3 ÷W×T
=0.1470×(ΔA-0.0034) ÷W×T
V 反總：反應(yīng)總體積：2.04mL；W：樣本質(zhì)量，g；T：稀釋倍數(shù)
注意事項(xiàng)
1. 試劑一有毒性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施，加熱前必須用封口膜密封，以防氣體溢出。
2. 加熱過(guò)程中有劇烈反應(yīng)，震蕩時(shí)輕搖，以免壓力過(guò)大噴出造成人生傷害。
3. 試劑三具有強(qiáng)刺激性，建議操作過(guò)程全部在通風(fēng)櫥子操作。
4. 取上清加試劑三步驟根據(jù)自己樣品乙?；潭?，試劑三的用量可調(diào)整，保證吸光值在0.1-0.8之間即可，并在公式中參與計(jì)算。
5.乙?；?/span>測(cè)定木質(zhì)素含量如受到實(shí)驗(yàn)環(huán)境的影響，可自行制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
植物木質(zhì)素（Lignin）分光光度法試劑盒