技術(shù)文章
3T3-L1細胞誘導(dǎo)分化
閱讀:625 發(fā)布時間:2019-4-223T3-L1鑒別協(xié)議
材料
杜爾貝科改良鷹培養(yǎng)基(DMEM;Gibcobrl cat_11965-084:高葡萄糖,含L-谷氨酰胺,含鹽酸焦氧化堿,不含丙酮酸鈉)
Calf Serum(GibcBrl CAT)16170- 078/批次(1060198)
胎牛血清(GiBCOBRL CAT 10433-028/批次1026566)-過濾器在混合到DMEM之前消毒(0.22UM過濾器)
異丁基甲基黃嘌呤(IBMX;Sigma I-7018)
地塞米松(Sigma D-4902)
胰島素(牛;Sigma I-5500)
Mem丙酮酸鈉(100 mm;Gibcobrl cat_11360-070)
PEN/STREP/谷氨酰胺(100x p/s/g;Gibcobrl CAT 10378-016)
解決
10%小牛血清/DMEM
60mL犢牛血清
6ml 100 mM丙酮酸鈉
6ML100X P/S/g
500毫升DMEM
10%個FBS/DMEM
60mL胎牛血清(過濾消毒)
6ml 100 mM丙酮酸鈉
6ML100X P/S/g
500毫升DMEM
IBMX溶液(新鮮)
a)在0.5N氫氧化鉀溶液中溶解IBMX,終濃度為0.0115g/ml。
b)通過0.22 mm注射器過濾器進行過濾消毒。