實驗方法原理    利用星形膠質(zhì)細胞、少突膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞生長存在時間上的差異、細胞生長方式及細胞對培養(yǎng)層黏附性不同等特性，用37℃恒溫搖床從培養(yǎng)的皮層來源的混合膠質(zhì)細胞中去除少突膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞，其中星形膠質(zhì)細胞的貼附力強。用這種方法獲得的星形膠質(zhì)細胞純度很高(95%以上），且細胞具有較好的增殖能力。
實驗材料    新生2-3d的SD大鼠仔鼠
試劑、試劑盒    含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+0.04%的EDTA)
儀器、耗材    37℃恒溫搖床
實驗步驟    
1.培養(yǎng)少突膠質(zhì)細胞，待10天后細胞分層，且星形膠質(zhì)細胞已經(jīng)*鋪滿底層，開始純化。

2在37℃恒溫搖床上，固定好培養(yǎng)瓶，以280r/min的速度能搖過夜，約20h。

3.次日，在顯微鏡下觀察上層細胞脫落情況，若上層細胞基本去除干凈，而下層細胞仍完好貼壁，就可終止純化。棄培養(yǎng)液后按照細胞傳代的方法將細胞從培養(yǎng)瓶中分離出來并再次接種。分離培養(yǎng)成功的細胞，沒有污染，狀態(tài)好，細胞增殖較快，1周左右能進行傳代，而且沒有太多的雜細胞。
注意事項    

1.搖床過夜純化細胞時注意用封口膜將瓶口封死，避免污染和漏氣。

2.如果下層細胞在震搖過夜后開始成片脫壁，應(yīng)及時終止震搖并開始傳代分離培養(yǎng)。

3.硝化后重新接種的星形膠質(zhì)細胞接種在多聚賴氨酸處理過的介質(zhì)上，否則細胞容易聚團生長，狀態(tài)不好。
其他    
1.選擇原代培養(yǎng)用的動物時，是新生2-3d的仔鼠，此時的皮層星形膠質(zhì)細胞數(shù)較多，且易存活。

2.原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細胞可以傳代培養(yǎng)，但應(yīng)確保每次實驗使用的細胞為同一代次的。

來源《神經(jīng)生物學(xué)實用實驗技術(shù)》第四軍醫(yī)大學(xué)出版社