尿酸（Uric Acid, UA）含量測定試劑盒說明書

可見分光光度法

注意：正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

UA 是鳥類和爬行類動物的主要代謝產物，正常人體尿液中產物主要為尿素，含少量尿酸。此外，UA 還是重要的抗氧化劑，能清除超氧化物，羥自由基等。體內 UA 生成量和排泄量不平衡會導致多種疾病的發(fā)生。例如，血中 UA 升高會引起痛風、腎功能損害和動脈硬化，相反 UA 降低會引起惡性貧血，在臨床診斷上具有重要的意義。

測定原理

尿酸酶能催化 UA 生成尿囊素，CO₂ 及H₂O₂ ，H₂O₂ 氧化亞鐵化鉀中的Fe²⁺生成Fe³⁺，F(xiàn)e³⁺進一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類化合物，在505nm下有特征吸收峰，測定反應體系505nm 的吸收值，可計算尿酸的含量。

自備實驗用品及儀器

恒溫水浴鍋、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

緩沖液：液體 15mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：

A. 用于標準管和測定管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 緩沖液溶解。

B. 用于空白管，粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 5mL 緩沖液溶解。

試劑二：粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10mL 雙蒸水水置于 60℃加熱溶解。

測定操作表

	標準管	空白管	測定管
試劑一（μL）	A, 200	B, 200	A, 200
H2O（μL）	600	800	600
試劑二（μL）	200
樣品（μL）			200
混勻，37℃水浴 30min，于 1mL 玻璃比色皿，空白管調零，分別測定標準管和測定管 A505 。

注意：空白管和標準管只需測定一次。

UA 含量計算公式

尿酸（μmol/L）=A₅₀₅測定管÷A₅₀₅標準管×C 標=A₅₀₅測定管÷A₅₀₅標準管×500

A₅₀₅測定管：測定管吸光值；A₅₀₅標準管：標準管吸光值；C標：標準品濃度500μmol/L

注意事項

1. 血清樣本請在24小時內測定，或者4℃密封避光保存不超過72小時。

2. 吸光值大于0.8可用蒸餾水稀釋樣本，并在計算公式中算入稀釋倍數。

3. 低檢出限為10μmol/L。