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技術(shù)文章

Bodian 蛋白銀法嗜銀細(xì)胞染色試劑盒

閱讀:813          發(fā)布時間:2020-6-3

 Bodian 蛋白銀染色法是美國科學(xué)家 David Bodian  1936 年創(chuàng)的用于觀察神經(jīng)元、軸突和樹突內(nèi)神經(jīng)原纖維變化的浸銀染色法。此法也用于嗜銀細(xì)胞染色。嗜銀細(xì)胞是一類起源于神經(jīng)外胚層,有強(qiáng)烈的嗜銀性和(或) 親銀性的細(xì)胞,也叫 Kultschitsky 細(xì)胞。該類細(xì)胞散在分布于胃、小腸與大腸的腺上皮內(nèi),其基底部細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有大小不等的分泌顆粒,又稱基底顆粒細(xì)胞。這些分泌顆??膳c銀鹽結(jié)合,在還原試劑的作用下金屬銀可以沉積在顆粒表面產(chǎn)生棕黑色沉淀,而親銀細(xì)胞和厭銀細(xì)胞則沒有此反應(yīng)。本試劑盒即根據(jù)此原理方法開發(fā), 具有下列特點(diǎn):

  1. 一站式,用戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分,尤其是蛋白銀。
  2. 本試劑盒可用于細(xì)胞涂片、切片和實(shí)體組織的顯色檢測。

本規(guī)格足夠進(jìn)行100 次切片的滴染法染色不含切片制備和脫蠟封固等試劑。本產(chǎn)品只能用于科研。

成份編號大紙盒包裝
蛋白銀染色液160442a100 mL
銅箔160442b10 張
還原液成分一160442c11g
還原液成分二160442c25g
草酸溶液160442d100 mL
硫代硫酸鈉溶液160442e100 mL
使用手冊160442sc1 份

 

運(yùn)輸及保存常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
自備試劑載玻片、蒸餾水、顯微鏡
使用方法一:準(zhǔn)備工作
  1. 新鮮配制蛋白銀溶液以配制 10mL 為例,足夠 10 張切片:在干凈的細(xì)菌培養(yǎng)皿中加入 10mL 去離子水,加入 0.1g 蛋白銀,不要搖晃,任蛋白銀在靜止?fàn)顟B(tài)下緩慢溶解。此溶液必須即配即用
  2. 新鮮配制還原液以配制 10mL 為例,足夠 10 張切片:稱 0.1g 還原液成分一和 0.5g 還原液成分二,加自備去離子水 10mL 溶解即可。此溶液不能保存后再使用,必須即配即用。
二、切片的染色
  1. 切片脫蠟后至水。制備切片時使用中性甲醛固定效果佳。
  2. 在 Coplin 染色缸中加入染色液,然后加入新鮮銅制作方法是在一干凈玻璃
  3. 培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)菌用中加入 7mL 水和 3mL 自備硝酸,將一張銅箔約 5g) 加入,去其表面氧化層,當(dāng)?shù)玫浇瘘S色表面時用鑷子取出后迅速用水洗干凈放入染色缸中可以折疊后加入,然后放入切片,在 37℃溫箱內(nèi)染色 48 小時。
  4. 擦去多余蛋白銀溶液后,用蒸餾水洗滌 2 分鐘。
  5. 將切片放入新鮮配制的還原液中還原 10 分鐘。
  6. 用流動水*洗切片 2 分鐘。
  7. 在草酸溶液中放置 3 分鐘。
  8. 用自來水洗凈。
  9. 在硫代硫酸鈉溶液中放置 5 分鐘。
  10. 自來水洗凈,在蒸餾水洗凈。
  11. 常規(guī)梯度酒精脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固(本試劑盒不含相關(guān)試劑。
  12. 顯微觀察:嗜銀細(xì)胞將呈現(xiàn)黑色或紫黑色

 

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