測定意義： 

土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集，對植物、動物和人類健康產(chǎn)生威脅。礦山開發(fā)、工 業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需 要測定土壤汞含量。 

測定原理： 

土壤經(jīng)消化后，汞以 Hg2+離子形式存在；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷 后，在 490nm 測定吸光度，即可計算 S-Hg 含量

 

土壤汞（S-Hg）濃度檢測試劑盒說明書
 微量法 100T/96S
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集，對植物、動物和人類健康產(chǎn)生威脅。礦山開發(fā)、工
業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需
要測定土壤汞含量。
測定原理：
土壤經(jīng)消化后，汞以 Hg2+離子形式存在；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷
后，在 490nm 測定吸光度，即可計算 S-Hg 含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍、100 目篩
（可更小）、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸、三氯甲烷和蒸餾水。
試劑組成和配制：
標準品：液體×1 支，4nmol/mL Hg 標準液，4℃保存。
試劑一：自備。在該試劑瓶中加入 52mL 蒸餾水，36 mL 濃鹽酸，12mL 濃硝酸，混勻，4℃
避光保存。
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 18.4 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加 3 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1 支，4℃保存。臨用前加 1.5 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑五：粉劑×1 瓶，4℃保存。臨用前加 5.2 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑六：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前加 20 mL 三氯甲烷充分溶解。
S-Hg 檢測：
1. 分光光度計/酶標儀預(yù)熱 30 min，體積波長到 490 nm，三氯甲烷調(diào)零。
2. 樣品管：風(fēng)干的土壤，過 100 目篩后精卻稱取 0.1 g 左右，裝入 EP 管；加入 1 mL 試劑一，
充分混勻后沸水浴消化 60 min。取出冷卻后室溫 8000g 離心 10min，吸取 20 μL 上清液加入
新的 EP 管；再先后加入 180 μL 蒸餾水和 20 μL 濃硫酸，混勻；后加入 180 μL 試劑二，
混勻后 40℃水浴 24h，期間震蕩數(shù)次。
2. 標準管：取 EP 管，加入 20 μL 標準液，180 μL 蒸餾水和 20 μL 濃硫酸，混勻；后加入
180 μL 試劑二，混勻后 40℃水浴 24h，期間震蕩數(shù)次。
3. 加入 20 μL 試劑三，震蕩直到無色；開蓋靜置 30min，期間搖蕩數(shù)次，以排出氣體。
4. 加入 10 μL 試劑四，充分混勻后靜置 5min；加入 50μL 試劑五，蓋緊后震蕩至少 1min，
靜置 10min 以分層。
5. 小心吸取 20 μL 下層溶液，加入 200 μL 試劑六，震蕩使無色，靜置 10 min 以分層。
6. 小心吸取 140 μL 下層溶液，加入微量玻璃比色皿/96 孔板，于 490nm 處比色，記錄各管
吸光值。記為 A 樣品管和 A 標準管。
注意：標準管只需測定一次。
S-Hg 濃度計算公式：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
Hg（nmol Hg/g 土壤）=[C 標×(A 測定管÷A 標準管)]×V 總÷V 樣÷W
 =200×(A 測定管÷A 標準管)÷W
C 標：標準液濃度，4 nmol/mL Hg；V 總：上清液總體積，1 mL；W：土樣質(zhì)量，g；V 樣：

加入上清液體積，20 μL=0.02 mL。
b.使用 96 孔板測定的計算公式如下
Hg（nmol Hg/g 土壤）=[C 標×(A 測定管÷A 標準管)]×V 總÷V 樣÷W
 =200×(A 測定管÷A 標準管)÷W
C 標：標準液濃度，4 nmol/mL Hg；V 總：上清液總體積，1 mL；W：土樣質(zhì)量，g；V 樣：
加入上清液體積，20 μL=0.02 mL。
注意事項：
1、試劑一有刺激性氣味，易揮發(fā)，實驗過程中應(yīng)注意佩戴口罩和手套，使用完立即蓋好蓋
子，以免試劑不夠；
2、測定過程中需加入濃硫酸，加濃硫酸時需注意，避免濺到皮膚或眼睛上；
3、靜置分層后，用 1mL 移液槍，排除空氣后，輕輕插入下層溶液中，緩慢吸取下層溶液。