測定意義 

GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生 H2O2， 是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 

測定原理 

GOD 催化產(chǎn)生 H2O2，過氧化物酶在有氧存在時催化 H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧 化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關系。

 

葡萄糖氧化酶（glucose oxidase，GOD）試劑盒說明書

 微量法 100 管/96 樣

正式測定前取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

GOD（EC 1.1.3.4）廣泛存在于動物、和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生 H2O2，

是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

測定原理

GOD 催化產(chǎn)生 H2O2，過氧化物酶在有氧存在時催化 H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧

化生成有色物質(zhì)，顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關系。

試驗中所需的儀器和設備

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、

研缽、冰、蒸餾水

試劑的組成和配制

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 19.2mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑三：液體 1mL×1 支，4℃保存；

樣品測定的準備

組織處理：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，

加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

血清（漿）：直接檢測。

測定步驟

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長至 500nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 GOD 檢測工作液的配制：用時將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中，充分混勻，待用；

用不完的試劑 4℃可保存一周；

3、測定前將 GOD 檢測工作液在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上。

4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本和 240μL 工作液，立即混勻并計時，記錄

500nm 下 20s 吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2。計算 ΔA＝A2-A1。

GOD 活力單位的計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清（漿）GOD 活力的計算

單位定義：每 mL 血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/mL）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷V 樣÷T=3333×ΔA

2、動物組織 GOD 活力的計算

（1）按蛋白濃度計算

單位定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(V 樣×Cpr)÷T=3333×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算

單位定義：每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/ g 鮮重）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷（W ×V 樣÷V 樣總）÷T=3333×ΔA÷W

V 反總：反應體系總體積，2.5×10-4

 L；ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺摩爾消光系數(shù)，7.5×103

L / mol

/cm；d：比色皿光徑，1cm；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL；V 樣總：加入提取液體積，1 

mL；T：反應時間，1 min； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

1、血清（漿）GOD 活力的計算

單位定義：每 mL 血清（漿）每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/mL）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷V 樣÷T=6666×ΔA

2、動物組織 GOD 活力的計算

（1）按蛋白濃度計算

單位定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷(V 樣×Cpr)÷T=6666×ΔA÷Cpr

（2）按樣本鮮重計算

單位定義：每 g 組織每分鐘催化產(chǎn)生 1nmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺為一個酶活力單位。

GOD（nmol/min/ g 鮮重）=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109

]÷（W× V 樣÷V 樣總）÷T=6666×ΔA÷W

V 反總：反應體系總體積，2.5×10-4

 L；ε：氧化型鄰聯(lián)茴香胺摩爾消光系數(shù)，7.5×103

L / mol

/cm；d：96 孔板光徑，0.5cm；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL；V 樣總：加入提取液體積，

1 mL；T：反應時間，1 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。