細胞遷移是指細胞在接收到內(nèi)源或外源遷移信號后而產(chǎn)生的移動。細胞遷移是通過胞體形變進行的緩慢的定向移動，涉及細胞覓食、傷口*、胚胎發(fā)生、免疫反應、感染和癌癥轉(zhuǎn)移等生理現(xiàn)象。因此通過對細胞遷移的研究，對阻止癌癥轉(zhuǎn)移、異體植皮等醫(yī)學應用方面具有一定意義。

 

細胞侵襲實驗則是研究腫瘤細胞對基質(zhì)膜消化后的遷移運動，腫瘤細胞須經(jīng)。血管基底膜穿入深面間質(zhì)后才能侵襲組織和轉(zhuǎn)移至遠處。

 

腫瘤細胞侵襲遷移能力的改變通常采用Transwell小室進行檢測。Transwell小室是一種膜濾器，也認為是一種有通透性的支架(Permeable Supports)。這層膜帶有微孔，孔徑大小0.1-12.0μm，根據(jù)不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜。

 

將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。將細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可用影像到上室內(nèi)的細胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

 

技術(shù)應用

 

應用包括細胞遷移、趨化(趨化因子對細胞的定向誘導)，侵襲(癌細胞侵襲上指腫瘤細胞向局部侵犯或遠處轉(zhuǎn)移)，共培養(yǎng)(同一培養(yǎng)體系里，兩種細胞非接觸性培養(yǎng))。細胞遷移侵襲上涉及多個步驟、高度完整的過程，在癌癥轉(zhuǎn)移、動脈粥樣硬化和關(guān)節(jié)炎等疾病惡化中起重要作用。

 

服務流程

 

1、客戶提供細胞實驗分組情況及實驗資料；
2、客戶提供檢測細胞。
3、客戶提供干預藥物。
4、客戶也可提供細胞；

 

孔板選擇

根據(jù) transwell 板的不同，transwell 小室可以分為 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直徑的小室；根據(jù)孔徑的不同，從小孔徑到大孔徑又分為 0.4μm 規(guī)格、3μm 規(guī)格、5μm 規(guī)格、8μm 規(guī)格，不同實驗對小室孔徑的要求也不一樣。

 

小于 3μm 孔徑的小室，細胞不會遷移通過，研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，應該選擇 3μm 以下的孔徑。例如共培養(yǎng)實驗和 caco-2 細胞轉(zhuǎn)運模型實驗。

 

共培養(yǎng)實驗

 

常用 0.4、34μm，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞 A 的影響。

 

 

細胞遷移的實驗

要用 5.0、8.0、12.0μm 的小室，這樣上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數(shù)進入下室的細胞量可反映細胞的趨化能力、遷移能力和侵襲能力。

 

趨化性實驗

細胞 B 對細胞 A 的趨化作用，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞 A 的趨化作用；趨化因子對細胞的趨化作用，將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

 

細胞遷移實驗

常用 8.0、12.0μm 膜，上室種細胞，下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子，細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計數(shù)進入下室的細胞量可反映細胞的遷移能力。

 

細胞侵襲實驗

常用 8.0、12.0μm 膜，原理與細胞遷移實驗類似。上室種細胞，下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子，細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，但與細胞遷移實驗不同的是，聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪上一層基質(zhì)膠，用以模仿體內(nèi)細胞外基質(zhì)，細胞欲進入下室，先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）將基質(zhì)膠降解，方可通過聚碳酸酯膜。計數(shù)進入下室的細胞量可反映細胞的侵襲能力。