技術(shù)文章
細胞慢病毒轉(zhuǎn)染
閱讀:602 發(fā)布時間:2021-6-21 一、貼壁細胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細胞接種6孔板,每孔細胞數(shù)約為1×105 個,
2.第二天,待細胞貼壁后,換液,
3.加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
4.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
5.12h后觀察細胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
6.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細胞生長情況,中途可以換液,保持細胞的活性,
7.當細胞長滿板底后,傳代至T25培養(yǎng)瓶中。
二、懸浮細胞的轉(zhuǎn)染
1.提前一天將細胞接種6孔板,每孔細胞數(shù)約為3×105 個,
2.第二天,換液后加入1mL*培養(yǎng)基,再加20 μL 慢病毒,
3.混勻后繼續(xù)培養(yǎng),
4.12h后觀察細胞狀態(tài),并更換為新鮮培養(yǎng)基,
5.轉(zhuǎn)染1周后,觀察細胞生長情況,中途可以換液,保持細胞的活性。