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技術(shù)文章

種子生活力檢測(cè)試劑盒(溴麝香草酚藍(lán)BTB法)

閱讀:603          發(fā)布時(shí)間:2021-12-18

 種子生活力檢測(cè)試劑盒(溴麝香草酚藍(lán)BTB)

上海雅吉生物科技有限公司

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

種子生活力是指種子能夠萌發(fā)的潛在能力或種胚具有的生命力,其高低決定了種子品質(zhì)和實(shí)用價(jià)值大小,關(guān)系到播種時(shí)的用種量,測(cè)定種子生活力常用方法為發(fā)芽實(shí)驗(yàn)法,即在適宜條件下讓種子吸水萌發(fā),在規(guī)定天數(shù)內(nèi)統(tǒng)計(jì)發(fā)芽的種子占供試種子數(shù)的百分比。但是常規(guī)發(fā)芽實(shí)驗(yàn)法需時(shí)較長(zhǎng),無(wú)法用于應(yīng)急需要,也無(wú)法檢測(cè)休眠種子的生活力。常用比較快速的檢測(cè)方法有氯化三苯基四氮唑(TTC)法、溴麝香草酚藍(lán)(BTB)法、紅墨水染色法和熒光法等。

具有生活力的種胚有呼吸作用,吸收空氣中氧氣放出二氧化碳,二氧化碳溶于水生成碳酸,又解離出氫離子和碳酸氫根,使得種胚周圍環(huán)境的酸度增加,因此可以用溴麝香草酚藍(lán)(BTB)來(lái)定性測(cè)定酸度的改變。BTB的變色范圍為PH6.0~7.6,在酸性介質(zhì)中呈黃色,在堿性介質(zhì)中呈藍(lán)色,中間色為綠色(變色點(diǎn)為7.1),因此可根據(jù)BTB顏色差異來(lái)判斷種子的生活力。本方法有以下優(yōu)點(diǎn):快速、準(zhǔn)確;顏色變化明顯,易于觀察。

二、產(chǎn)品組成:

名稱規(guī)格

100ml

存儲(chǔ)

試劑(A)BTB指示劑

100ml

RT避光

試劑(B):瓊脂粉

1.5g

RT

使用說(shuō)明書

一份

 三、自備材料:

1、材料:小麥、綠豆、水稻、油菜、花生、玉米等植物種子

2、恒溫箱

3、培養(yǎng)箱

4、培養(yǎng)皿

 四、操作步驟(僅供參考) 種子生活力檢測(cè)試劑盒(溴麝香草酚藍(lán)BTB)

1、浸種:將待測(cè)種子用30℃溫水浸泡2~6h,使種子充分吸脹。

2、配制BTB瓊脂凝膠:取適量的BTB指示劑和瓊脂粉,按BTB指示劑:瓊脂粉比例=10ml:0.15g的比例混合,用恒溫箱或微波爐加熱助溶,待瓊脂粉溶解后,趁熱倒在干凈的培養(yǎng)皿即為BTB瓊脂凝膠,厚度以能浸沒(méi)種子為宜,冷卻后備用。

3、隨機(jī)取100粒吸脹種子,種胚朝下,整齊地埋于BTB瓊脂凝膠中,間距至少1cm。

4、將培養(yǎng)皿置于30~35℃恒溫箱中培養(yǎng)1~4h。

5、在藍(lán)色背景下觀察,種胚附件呈現(xiàn)較深黃色暈圈的是活種子,否則是死種子。

6、可以用在沸水中浸泡處理的種子進(jìn)行多種觀察。

 五、染色結(jié)果:

活種子

種胚附近呈深黃色

死種子

種胚附近無(wú)顏色變化

 六、計(jì)算:

觀察統(tǒng)計(jì)100粒種子,計(jì)算有活力種子的百分?jǐn)?shù)。

其公式為:種子生活力百分?jǐn)?shù)(%)=活種子粒數(shù)/100×100%

 七、注意事項(xiàng):

1、BTB凝膠厚度取決于種子的大小,原則上需種胚接觸培養(yǎng)皿底部后尚有部分露出凝膠上方,凝膠厚度應(yīng)使種子穩(wěn)定其中。

2、種子需完好無(wú)損,不能有破種子或霉變種子。

3、BTB指示劑應(yīng)為藍(lán)色溶液,如變黃色或綠色,說(shuō)明pH降低,可滴加稀氨水或者氫氧化鈉等堿性試劑調(diào)整為藍(lán)色即可正常使用。

4、培養(yǎng)溫度一般以30~35℃為宜。

 八、有效期:12個(gè)月有效。

 九、相關(guān)產(chǎn)品:

1

Masson三色染色液

2

多聚甲醛溶液(4%PFA)

3

GUS染色液

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5

尿素(Urea)檢測(cè)試劑盒(脲酶波氏比色法)

6

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