肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

 

一、產(chǎn)品簡介：

肌酉酐(creatinine ,Cr)是人體或動物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐，由腎小球濾過排出體外，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物，內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物。

雅吉生物肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點比色法)檢測原理是肌酐與鹽發(fā)生Jaffe反應(yīng)，生成橘紅色的苦肌酐復(fù)合物，該復(fù)合物生成量與肌酐含量呈正比，通過酶標儀測定510nm 處吸光度，可用于檢測人體、動物的血漿、血清、尿液樣品中肌酐含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

 

二、產(chǎn)品組成：

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

三、自備材料：

1、1.5ml離心管、96孔板

2、離心機、酶標儀

3、蒸餾水

 

四、操作步驟(僅供參考)：

1、準備樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備，-20℃凍存。取血清或血漿0.05ml，加入蛋白沉淀液0.45ml，充分混勻，靜置5min后3500r/min離心10min，取上清液，4℃保存待用;尿液中肌酐含量較高，應(yīng)先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測。

2、配制標準品工作液︰取肌酐標準(10mmol/L)，按肌酐標準(10mmol/L)∶肌酐標準稀釋液=1:99的比例混合，使?jié)舛冗_到100μmol/L，即為標準品工作液-肌酐標準(100μmol/L);4℃保存，1周有效。

3、Cr加樣:按照下表設(shè)置空白孔、標準孔、測定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。

 

 

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

 

4、Cr檢測︰充分混勻，室溫放置15min，酶標儀檢測510nm吸光度，空白孔調(diào)零，讀取各孔吸光度，分別為A標準、A測定。

 

計算：

 

血清(漿)肌西酐(μmol/L)=(A測定/A標準)×100

尿液肌西(μmol/d)=(A測定/A標準)×100×N×24h尿量(L)

式中∶

A測定=測定孔的吸光度

A標準=標準孔的吸光度

N=尿液稀釋倍數(shù)

內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)

校正的內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=內(nèi)生肌酐清除率值×1.73/體表面積(m2)

注︰以正常人24h內(nèi)生肌酐清除率值為128L(即24h 內(nèi)有128L血液中的肌酐通過腎臟被清除)作為*，則內(nèi)生肌酐清除率(%)=校正的內(nèi)生肌酐清除率值×100/128(或0.78)

單位換算:d=24h

 

參考區(qū)間：

注意事項:

1、測定各孔時，各孔溫度均需達到室溫，否則影響結(jié)果。

2、輕度溶血樣本對肌酐測定無影響﹔尿液樣品中肌酐含量較高，樣品需做50~200倍稀釋，如果顯色后吸光度仍較高，還需將尿液繼續(xù)擴大稀釋倍數(shù)，重新檢測。

3、呈色后標準管吸光度較穩(wěn)定，但測定管吸光度隨時間延長而增加﹔另外肌酐濃度越高，吸光度變化越快，因此加入顯色劑后30min內(nèi)完成檢測為宜。

4、以標準品做梯度實驗，200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色，超過200μmol/L顏色逐漸加深，呈橘紅色，到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標儀測定100μmol/L，吸光度值在0.3左右。

有效期:12個月有效。

附錄∶標準曲線制作:在室溫條件下按說明書操作，用酶標儀505nm對標準梯度進行吸光度的測定，其數(shù)值及標準曲線如下(僅供參考)︰

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)