ELISA 基 礎(chǔ) 知 識(shí)

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● ELISA = Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay ：

酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)，利用抗原抗體的特異性反應(yīng)，對(duì)樣本中可溶性目的產(chǎn)物進(jìn)行定量檢測(cè)

● ELISA 與常規(guī)免疫實(shí)驗(yàn)對(duì)比：

ELISA樣本制備簡(jiǎn)單；靈敏度高（pg/ml）；特異性強(qiáng)；重復(fù)性好；操作簡(jiǎn)單；檢測(cè)儀器易獲得（酶標(biāo)儀）。

● ELISA 種類

● 各種 ELISA 特點(diǎn)

● ELISA 應(yīng)用場(chǎng)景

八 大 質(zhì) 控 指 標(biāo)

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不是所有的ELISA試劑盒開發(fā)都如此嚴(yán)格！

每個(gè)指標(biāo)的ELISA試劑盒都進(jìn)行了8大指標(biāo)的質(zhì)控。6項(xiàng)利。ISO9001質(zhì)量管理體系。值得您信賴！

ELISA 實(shí) 驗(yàn) 步 驟

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● ELISA簡(jiǎn)要步驟（雙抗體夾心法）

ELISA 操 作 注 意 事 項(xiàng)

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標(biāo) 準(zhǔn) 曲 線 擬 合

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標(biāo)準(zhǔn)品濃度和相應(yīng)的吸光度（OD）值如果能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系是想的，這時(shí)可以通過Excel等方便的獲得擬合曲線，進(jìn)而推算出樣品的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少能夠有這么理想的情況，標(biāo)品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系，這時(shí)就不能用直線擬合的方式了，而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。

關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分。Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的適用性。在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi)，Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。用來定量，S形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩端的平坦部分計(jì)算誤差會(huì)大，有時(shí)甚至?xí)艽蟆?/span>

所以關(guān)鍵在于你檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分可以用直線方程，中間部分可用對(duì)數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。

目前國(guó)際上流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合"，用這種擬合方式往往能夠比較精確的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系，從而獲得比較正確的樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。