實驗方法原理    
斑點金免疫滲濾測定實驗是在斑點免疫滲濾測定法基礎(chǔ)上，改用膠體金標(biāo)記物代替酶，省去底物顯色的步驟。試驗方法是以硝酸纖維素膜（NC膜）為載體，將試劑及標(biāo)本滴加在膜上，通過滲濾而逐步反應(yīng)。全過程可于數(shù)分鐘內(nèi)完成，陽性結(jié)果在膜上呈紅色斑點。
實驗材料    細(xì)胞樣品
試劑、試劑盒     PBS吐溫-20BSA特異性抗體 抗原金標(biāo)抗體
儀器、耗材    滲濾裝置NC膜
實驗步驟    
一、試劑及材料
 
1.  滲濾裝置：為一塑料小盒（4x3x0.6 cm），分為底、蓋兩層，蓋的中央有一個直徑0.5 cm的小孔。盒底充填吸水性較強的墊料，蓋孔下，緊貼墊料放置一片NC膜。緊閉盒蓋，即為滲濾裝置。在孔中的NC膜上點加1-2 ml特異性抗體(一抗)或抗原，室溫自然干燥，保存于放干燥劑的密封塑料袋中備用。
 
2.  封閉液：含0.2%BSA和0.05%吐溫-20的洗滌液。
 
3.  洗滌液：50 mol/L，pH7.2 PBS。
 
4.  特異性抗體(一抗)或抗原
 
5.  金標(biāo)抗體
 
二、操作方法
 
1. 取出滲濾器，先在小孔的NC膜上，滴加2滴（約100 ml）封閉液；
 
2. 待其滲入盒內(nèi)，在NC膜上，加待檢標(biāo)本1滴（約50 ml）；
 
3. 待其滲入盒內(nèi)，在NC膜上，滴加2滴（約100 ml）洗滌液；
 
4. 待其滲入盒內(nèi)，在NC膜上，加金標(biāo)抗體1滴（約50 ml），使其與NC膜上吸附的檢品發(fā)生反應(yīng)；
 
5. 待其滲入盒內(nèi)，在NC膜上，滴加2滴（約100 ml）洗滌液；
 
6. 至洗滌液*滲入盒內(nèi)
 
三、結(jié)果觀察
 
在小孔NC膜上出現(xiàn)紅色反應(yīng)時為陽性反應(yīng)，陰性反應(yīng)不著色。
 
 
收起 
注意事項    
1.   特異性抗體(一抗)或抗原、待檢標(biāo)本和金標(biāo)抗體的用量事先都必須應(yīng)用方陣法確定適用量。