乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒

乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒（LDH Cytotoxicity Assay Kit），也稱乳酸脫氫酶檢測試劑盒（LDH Assay Kit）或乳酸脫氫酶釋放檢測試劑盒（LDH Release Assay Kit），是一種基于diaphorase催化的INT顯色反應，通過比色法檢測細胞毒性時釋放的乳酸 脫氫酶活性或檢測其它樣品中的乳酸脫氫酶活性的試劑盒

上海雅吉生物的乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也稱乳酸脫氫酶檢測試劑盒(LDH Assay Kit)或乳酸脫氫酶釋放檢測試劑盒(LDH Release Assay Kit)，是一種基于diaphorase催化的INT顯色反應，通過比色法檢測細胞毒性時釋放的乳酸 脫氫酶活性或檢測其它樣品中的乳酸脫氫酶活性的試劑盒。
      本試劑盒可以用于常規(guī)的乳酸脫氫酶活性的檢測，更常用于以LDH釋放為指標的細胞毒性檢測。同時，基于細胞總?cè)樗崦摎涿富钚缘臋z測，本試劑盒也可以用于檢測細胞增殖和細胞毒性檢測。
      細胞凋亡或壞死而造成的細胞膜結(jié)構(gòu)的破壞會導致細胞漿內(nèi)的酶釋放到培養(yǎng)液里，其中包括酶活性較為穩(wěn)定的乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通過檢測從質(zhì)膜破裂的細胞中釋放到培養(yǎng)液中的LDH的活性，就可以實現(xiàn)對細胞毒性的定量分析。LDH釋放被看做細胞膜完整性的重要指標，并被廣泛用于細胞毒性檢測。LDH釋放被認為是以前使用放射性的51Cr標記細胞，隨后通過51Cr釋放進行 細胞膜完整性檢測的安全有效的替代方法。
      乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒的基本原理是，在乳酸脫氫酶的作用下，NAD+被還原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-
nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脫氫酶(diaphorase)催化反應生成NAD+和強生色物甲臜(formazan)，在490nm波長下產(chǎn)生吸收峰，從而可以通過比色來定量乳酸脫氫酶的活性。吸光度與乳酸脫氫酶活性成線性正相關。該酶聯(lián)反應原理的示意圖如下：

 可檢測細胞培養(yǎng)液、細胞裂解液等樣品中乳酸脫氫酶的活性。一個試劑盒可進行100次檢測。
包裝清單：
產(chǎn)品編號    產(chǎn)品名稱    包裝
C0016-1    LDH釋放試劑    1.5ml
C0016-2    乳酸溶液    2ml
C0016-3    酶溶液    1ml×2
C0016-4    INT溶液(10X)    0.2ml
C0016-5    INT稀釋液    2ml
—    說明書    1份
保存條件：
      -20℃保存，一年有效。C0016-3需注意避免反復凍融。C0016-4需避光保存。試劑盒解凍后可以短期4℃存放，2-3天內(nèi)有效。
注意事項：
      冷凍會使樣品中部分乳酸脫氫酶失活，4℃可放置2-3天。建議樣品準備好后盡量當天完成測定。
      如果檢測細胞培養(yǎng)液中的乳酸脫氫酶，由于血清含有乳酸脫氫酶，建議血清的使用濃度不要超過1%，并使用熱滅活血清。如果一定需要使用10%血清，在檢 測時一定要設置沒有細胞，但加入了相同體積培養(yǎng)液的對照孔，以用于消除背景。
      細胞過度生長、密度過高、離心速度過大、培養(yǎng)箱內(nèi)外溫差過大，都會造成細胞釋放乳酸脫氫酶增加。
      如果希望進行乳酸脫氫酶活性的定量，用戶需自備乳酸脫氫酶標準品。
      僅限于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。 
      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。