人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa試劑盒

人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa試劑盒應(yīng)用酶聯(lián)免疫競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定標(biāo)本中指標(biāo)含量水平。用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加：A，和HRP 標(biāo)記的指標(biāo)抗原，使它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。樣本顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中的含量。

人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa試劑盒優(yōu)點(diǎn)如下：

1、操作簡(jiǎn)便：可將試劑混合成單試劑操作，全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。
2、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放12個(gè)月有效,試劑配制后至少能存放6個(gè)月；呈色穩(wěn)定，     
顯色后24小時(shí)吸光度不變。
3、再現(xiàn)性好：批內(nèi)CV=2.3%，批間CV=5.34%。
4、回收試驗(yàn)： X =101.8%。
5、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
6、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織、各種水產(chǎn)等，效果均佳。
 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Elisa試劑盒動(dòng)物組織樣本的前處理:

1、取組織塊（0.1g～0.2g）在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱(chēng)重，放入勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（推薦使用0.86%的生理鹽水）于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式有多種：手工勻漿，機(jī)器勻漿，超聲粉碎。
①、手工勻漿：將玻璃勻漿管置于冰水浴條件下，手動(dòng)勻漿，30秒/次，間隔30秒，重復(fù)6～8次，制成10%的勻漿液。
②、機(jī)器勻漿：用機(jī)械式勻漿機(jī)（組織搗碎機(jī)或內(nèi)切式勻漿機(jī)），8000～10000轉(zhuǎn)/分，冰水浴條件下，10秒/次，間隙30秒，連續(xù)3～5次。（皮膚、肌肉組織等可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間）
③、超聲粉碎：用超聲粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細(xì)胞破碎，也可用國(guó)產(chǎn)超聲波發(fā)生儀，用400安培，5秒/次，間隙10秒反復(fù)3～5次。
鏡檢觀(guān)察:取少量組織勻漿作涂片，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞是否破碎，若沒(méi)有則可延長(zhǎng)勻漿時(shí)間。
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機(jī)或低溫低速離心機(jī)2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定.（測(cè)定相應(yīng)指標(biāo)的同時(shí)需測(cè)一下相應(yīng)樣本的蛋白濃度，總蛋白測(cè)試盒本所有售）

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