倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21C-13

細(xì)胞名稱：倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21[C-13]
生長(zhǎng)特性：貼壁  懸浮 半懸浮半貼壁（詳情可咨詢我們）
生長(zhǎng)條件：詳情索取該產(chǎn)品說(shuō)明書
培養(yǎng)條件：90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)溫度：37℃
空氣條件：5% CO2,95% AIR
傳代方法：1:2傳代，2~3天換液
凍存條件：0%FBS+10%DMSO

BHK-21 [C-13]倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞 ：

        1961年3月，I.A. Macpherson和M.G.P. Stoker從1日齡的倉(cāng)鼠建立了BHK-21 (C-13)的親本。隨后84天連續(xù)培養(yǎng)，僅中斷8天進(jìn)行凍存，通過(guò)單細(xì)胞分離建立了13號(hào)克隆。這株細(xì)胞可用作轉(zhuǎn)染宿主，用于表達(dá)包含選擇及擴(kuò)增標(biāo)記的DNA(如Factor VIII,見(jiàn)ATCC CRL-8544)的載體。 

動(dòng)物種別 ：倉(cāng)鼠 
性別 ：*** 
組織來(lái)源 ：正常腎 
形態(tài) ：成纖維細(xì)胞 

倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21[C-13]，使用方法
1、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，zui后放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過(guò)夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。 
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中， 1000rpm離心5min；
3）棄上清，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21[C-13]，原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別？細(xì)胞培養(yǎng)物來(lái)源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長(zhǎng)空間，以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng)，分化的細(xì)胞群，因其經(jīng)過(guò)遺傳改造，致使其具有無(wú)限增長(zhǎng)的潛能。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上，連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
1、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍，通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過(guò)程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng)。
2、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理？收到包裝箱后，立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過(guò)程盡量快以避免升溫。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃，這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
3、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開(kāi)始正常人類細(xì)胞培養(yǎng)？推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無(wú)菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專家。
倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞BHK-21[C-13]，部分相關(guān)產(chǎn)品如下：

腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體
脂聯(lián)素受體2抗體
一氧化氮合成酶-2（誘導(dǎo)型）抗體
絲裂原活化蛋白激酶1/ERK 1/2抗體
周期素D1抗體
造血干細(xì)胞抗原CD133抗體
表皮生長(zhǎng)因子受體抗體
Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體
基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體
腫瘤抑制基因P53蛋白/野生型P53抗體
組蛋白H3抗體
活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9抗體
白介素1β抗體 
一氧化氮合成酶-3（內(nèi)皮型）抗體
白細(xì)胞介素10抗體
3-磷酸甘油醛脫氫酶抗體
核心結(jié)合因子α1/成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子/Cbfα1抗體
5-溴脫氧尿嘧啶核苷抗體
上皮鈣粘附分子抗體
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體
CD4抗體
增殖細(xì)胞核抗原抗體
環(huán)氧合酶2/前列腺素內(nèi)過(guò)氧化物合成酶2抗體
血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子1抗體

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