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詳細介紹
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產(chǎn)品名稱：Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞)
規(guī)格：5×106cells
貨號：YS-02X9614
產(chǎn)品分類:細胞系
儲存條件2℃-8℃，避光儲存
運輸條件冰袋冷藏運輸
注意事項
1、使用產(chǎn)品時應注意無菌操作，避免污染。
2、本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3、為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果，不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4、所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5、本產(chǎn)品只供進一步科研使用，不可應用于臨床等其他方面。
實驗材料：
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶
2. 100ml滅菌燒杯2個； 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞
3、50ml離心筒2個
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數(shù)板1塊；
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；
8、酒精燈1臺；
細胞復蘇步驟：
1：水浴鍋預熱至37℃?zhèn)溆?/span>
2：準備15mL離心管，并向其中加入適量培養(yǎng)基待用
3：將細胞凍存管從-80℃冰箱或液氮中取出，放入PE手套中，迅速投入水浴鍋
4：用力搖晃凍存管，使其在1分鐘內(nèi)融化
5：用紙巾擦拭水漬，轉(zhuǎn)移至生物安全柜。用移液槍吸取細胞懸液，緩慢滴加到步驟2中準備好的離心管
6：1200rpm離心3分鐘
7：棄上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，接種至新的無菌培養(yǎng)器皿中
Phospho-NMDAR1(Ser896) 磷化谷氨受體1抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-Tuberin/TSC2(Ser1420) 磷化結(jié)節(jié)性硬化抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-28A/IFNL2 白細胞介28A抗體 規(guī)格: 0.2ml
ECT2 上皮細胞轉(zhuǎn)化2抗體 規(guī)格: 0.1ml
C-Met/Met/HGFR 肝細胞生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
Desmocollin 1 橋粒糖1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 1mg
PRRSV M protein 豬藍耳病病毒M抗體 1ml
LI-cadherin 肝腸鈣粘連抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/APC APC標記的兔抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
PKC epsilon 激C抗體 規(guī)格: 0.1ml
C20orf194 20號染色體開放閱讀框194抗體 規(guī)格: 0.2mlCAPG2/NCAPG2 染色體相關2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Hepa 1-6(小鼠肝癌細胞)83-86-3植 規(guī)格： HPLC≥94%,20mg/支
刺梨葉 規(guī)格： 1g
桃枝 規(guī)格： 0.5g
110011-77-38-去乙?；釣?8-deacetyl 規(guī)格： 20mg
535-83-1 規(guī)格： 20mg
通 規(guī)格： 2g
140147-77-9朝藿定A1;Epimedin A1 規(guī)格： 20mg
16830-15-2積雪草 規(guī)格： 20mg
23180-57-6芍藥 規(guī)格： 20mg
三七 規(guī)格： 20mg
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
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