詳細(xì)介紹
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:巴馬森林病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Barmah Forest Virus(BFV) RTPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
豬痘病毒PCR檢測試劑盒
豬水泡病病毒PCR檢測試劑盒
氣管比翼線蟲PCR檢測試劑盒
塔卡里伯病毒PCR檢測試劑盒
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 | 二、操作步驟 |
1. DNA模板 | 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 |
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
Goat Anti-rat IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.3ml
FNDC5: Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體 0.2ml
單核-巨噬細(xì)胞基質(zhì)金屬抗體 Anti-CD147/EMMPRIN 0.1ml
Anti-NR2B/NMDAR2B /FITC 熒光素標(biāo)記谷受體2B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PMCA4/Calcium Pump PMCA4 ATPase 細(xì)胞膜鈣ATP酶4抗體 規(guī)格 0.2ml
Anti-CEA/Gold 膠體金離子標(biāo)記鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: LpPLA2 ELISA Kit
基質(zhì)金屬11(MMP11)ELISA檢測試劑盒Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit 96T/48T
犬抗復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒 Canine thrombin-aithrombin complex,TAT ELISA Kit
英文名稱HumanInsulin-likegrowthfactorbindingprotein3,IGFBP3ELISAKIT人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)規(guī)格:96T/48T
化人體RUNX3基因重組表達(dá)載體(pcDNA-RUNX3)測序引物對2OD
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISA試劑盒大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
巴馬森林病毒PCR檢測試劑盒3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠解整合素樣金屬8(ADAM8)ELISA試劑盒 96T/48T
3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 88191-14-4 中文名: 分子式:C28H44O4 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA試劑盒 96T/48T
3-tert-Butoxycarbony-2-(4-anisyl)-4-phenyl-5-oxazolidinecarboxylic acid 196404-55-4 中文名: 分子式:C22H25NO6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T
3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠解脲脲原體抗體elisa試劑盒 小鼠解脲脲原體抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠解脲脲原體抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠解脲脲原體抗體試劑盒、小鼠解脲脲原體抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 103335-55-3 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠角化細(xì)胞因子elisa試劑盒 小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠角化細(xì)胞因子試劑盒、小鼠角化細(xì)胞因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。