技術(shù)文章
人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要
閱讀:138 發(fā)布時間:2020-5-14人白介素6 高敏ELISA試劑盒操作概要:
1.實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2.加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50μL,37℃孵育30分鐘;
3.洗板5次,加酶標(biāo)試劑50ul,37℃孵育半小時;
4.洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘
5.加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)。
6.計算
結(jié)果判斷:
1.每個標(biāo)準(zhǔn)品的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.推薦使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3或1.4,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可將樣品的OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
3.若樣品OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。