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技術(shù)文章

豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒操作步驟

閱讀:115          發(fā)布時(shí)間:2021-9-22

豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

甲砜霉素(T1100000

甲苯噻嗪 雜質(zhì)E(Y0000159

甲苯噻嗪 雜質(zhì)C(Y0000158

甲苯磺丁脲;甲糖寧(T1700000

脊髓灰質(zhì)炎疫苗 (滅活 BRP (干冰運(yùn)輸(P2160000

脊髓灰質(zhì)炎疫苗 (口服 BRP (干冰運(yùn)輸(P2161000

左旋肉堿(L0 99900

左旋咪唑:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000047

左旋咪唑 - 對(duì)照譜圖(Y0000048

左旋甲狀腺素鈉(L0570000

左旋多巴(L0400000

左炔諾孕酮(L0551000

左美丙嗪鹽酸鹽(L0500000

左美丙嗪馬來(lái)酸鹽(L0505000

左卡尼汀雜質(zhì)A;左旋肉毒堿雜質(zhì)A(L0 99905

左卡巴斯汀雜質(zhì)D(L0 90008

組胺磷酸鹽(H0700000

棕櫚酸異丙酯(I0725000

棕櫚酸(P0090000

紫杉醇雜質(zhì)C(Y0000699

紫杉醇(天然:用于峰鑒別試驗(yàn)(Y0000700

紫杉醇(半合成:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y00007 9

紫杉醇(半合成:用于峰鑒別試驗(yàn)(Y0000719

紫杉醇(Y0000698

豬胰島素(I0 20000

制霉菌素(N1400000

脂蟾毒配基,蟾力蘇,酯蟾毒配基180555

硬酯酸甲酯C18(M1770200

硬脂酸膽固醇酯0 5805

硬脂酸膽固醇酯0 5801

茚地那韋:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000746

茚地那韋(Y0000788


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