人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209培養(yǎng)

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全：大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好，飽滿(mǎn)，光澤度好，*，專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶(hù)！

細(xì)胞名稱(chēng)  人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 懸浮聚集生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞由Gazdar AF及其同事于1979年從一名小細(xì)胞肺癌患者的骨髓轉(zhuǎn)移灶中分離建立，該骨髓標(biāo)本的獲取先于患者的治療。該細(xì)胞是一種典型的小細(xì)胞性肺癌細(xì)胞，表達(dá)較高水平的4種生化標(biāo)志：

神經(jīng)特異性烯醇、肌酸激酶腦型同工酶、左旋多巴脫羧酶、鈴蟾肽樣免疫活性。c-myc DNA序列沒(méi)有擴(kuò)增；未發(fā)現(xiàn)大的結(jié)構(gòu)DNA的異常；該細(xì)胞合成與正常肺相當(dāng)量的p53 mRNA。該細(xì)胞以聚集體的形式懸浮生長(zhǎng)，只有聚集體中的細(xì)胞是有活力的，但是細(xì)胞活率無(wú)法估計(jì)，一般培養(yǎng)基中含有大量的細(xì)胞碎片。該細(xì)胞表達(dá)異常的RB1蛋白，其706  

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 20%FBS　

傳代方法 1：

2傳代；5~7天1次。  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）　

STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：9，12；D18S51：13；D19S433：14.2，15；D21S11：32.2；D2S1338：17，20；D3S1358：18，20；D5S818：12；D7S820：9；D8S1179：12，13；FGA：20，24；TH01：7，9；TPOX：8；vWA：18，19；

同工酶

染色體 　

使用權(quán)限 A類(lèi)
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Annexin V/PE 熒光素PE標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、Annexin V抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 Anti-phospho-ATF2 0.1ml

ZAN 英文名稱(chēng)： 透明帶黏附蛋白ZAN抗體 0.2ml

DOCK1 英文名稱(chēng)： 細(xì)胞質(zhì)分裂付出蛋白1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-EIF4B (Ser540) 磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 磷酸化eIF-4E(Ser209)抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
TUBB(Human Beta-tubulin) ELISA kit 人β-微管蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素 96T

PGF2 alpha 英文名稱(chēng)： 前列腺素F2a/PGF2 α抗體 0.2ml

C2orf60 英文名稱(chēng)： 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框60抗體 0.2ml

Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
人β-1,3-半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(β3GALT2)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒，英文名：IgA ELISA Kit大鼠β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(βACE2)ELISA試劑盒，英文名：βACE2 ELISA Kit豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒，英文名：CGRP ELISA KiISA Kit for Human Serine--pyruvate aminotransferase小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒，英文名：INS ELISA KiISA Kit for Human Agrin小鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒，英文名：STK ELISA KiISA Kit for Human Beta-1, 4-galactosyltransferase 5小鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒，英文名：P-PKC ELISA Kit人成纖維生長(zhǎng)因子受體1（FGFR-1）ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠凝血因子Ⅸ(F9)ELISA試劑盒，英文名：F9 ELISA Kit

人硫代嗎啉羧化物脫氫酶(CRYM) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA試劑盒，英文名：Alox5 ELISA KiISA Kit for Human Aspartate aminotransferase, mitochondrial小鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒，英文名：ADAM8 ELISA Kit人次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA試劑盒，英文名：CASP11 ELISA KiISA Kit for Human HDL-cholesterol小鼠端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)ELISA試劑盒，英文名：TEP1 ELISA Kit人干擾素α2(IFN-alpha-2)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)ELISA試劑盒，英文名：LECT2 ELISA KiISA Kit for Human Insulin receptor小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒，英文名：Slit2 ELISA Kit人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒，英文名：PⅢNP ELISA Kit
品名 規(guī)格 備注

phospho-ZFP36L1(Ser334) 英文名稱(chēng)： 磷酸化鋅指蛋白36抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R (Tyr723) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml

GPR30(G Protein Coupled Receptor 30) G蛋白偶聯(lián)受體30抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

DeltaD 英文名稱(chēng)： DeltaD抗體 0.2ml

PPM1A PPM1A / PP2C-alpha 鼠單抗 (PE) Human
FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit 人胚胎性硫糖蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-HHV8/ORF K2 類(lèi)皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MG 雞毒支原體抗體 規(guī)格 0.2ml

AC-1(Human adenylyl cyclase 1) ELISA Kit 人腺苷酸環(huán)化酶1 96T

REG1 beta 英文名稱(chēng)： 胰島細(xì)胞再生因子β抗體 0.2ml

C5orf49 英文名稱(chēng)： 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體 0.2ml

Anti-HHV8/ORF K2 類(lèi)皰疹病毒8抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。