詳細介紹
細胞名稱 人B淋巴細胞白血病細胞;BALL-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 淋巴細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一典型的人B淋巴細胞白血病病人。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640(含2mM L-glutamine) (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 PN2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR Amelogenin:XY;CSF1PO:10,12;D13S317:9,12;D16S539:9;D18S51:12,13;D19S433:13,15.2;D21S
人B淋巴細胞白血病細胞;BALL-1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-SIAH1/FITC 熒光素標記泛素連接酶Siah1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
三磷酸鳥苷環(huán)水解酶抗體 Anti-GTP-CH-1 0.2ml
Dog IgM/Cy3 Cy3標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM59B 英文名稱: FAM59B蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RUNX2(Ser451) 磷酸化成骨特異性轉錄因子抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
sCD14 ELISA Kit 大鼠可溶性CD14Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TIF1 beta/KAP1 轉錄中介因子Tif1β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的羊抗IgG 規(guī)格 0.1ml
BRCA-1(Human breast cancer susceptibility protein 1) ELISA Kit 人癌易感蛋白1 96T
Lipocalin 2 英文名稱: 脂質運載蛋白抗體 0.1ml
BEAN1 英文名稱: 脊髓小腦共濟失調蛋白BEAN1抗體 0.2ml
Anti-TIF1 beta/KAP1 轉錄中介因子Tif1β抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TNF- Beta(Human Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 人壞死因子β 96T
MAP1B 英文名稱: 微管相關蛋白1B抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXO42 FBXO42蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
IL-15 ELISA KIT 大鼠白介素15Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
AVPR1B 英文名稱: 抗利尿激素受體1B抗體 0.2ml
Anti-phospho-Afadin(Ser1718) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化絲狀肌動蛋白結合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human Collagenase Type II ELISA Kit 人膠原酶IIMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神經纖維瘤抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-2 白介素2抗體(大、小鼠) 規(guī)格 0.2ml
AT(Human Anti-trypsin) ELISA Kit 人抗胰蛋白酶 96T
PGRMC 英文名稱: 孕激素受體膜相關元件抗體 0.2ml
CD82 英文名稱: 轉移抑制蛋白1抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Merlin (Ser518) 磷酸化2型神經纖維瘤抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml