小鼠黑色素瘤瘤株；B16培養(yǎng)

小鼠黑色素瘤瘤株；B16培養(yǎng)只能用于科研，不得用于臨床。應(yīng)用公司細胞庫細胞株種類齊全：大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態(tài)良好，飽滿，光澤度好，*，專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶！

細胞名稱  小鼠黑色素瘤瘤株；B16培養(yǎng)
形態(tài)特性 實體瘤

品牌 體內(nèi)生長

特征特性 可以產(chǎn)生黑色素。

培養(yǎng)條件 -

傳代方法 制備成細胞懸液接種至C57BL小鼠體內(nèi)成瘤。

傳代情況 不詳

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體 -

使用權(quán)限 A類

小鼠黑色素瘤瘤株；B16培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光素標記磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

hypothetical protein抗體 Anti-Hypothetical protein 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG 1mg

FASTK 英文名稱： Fas活化的絲/蘇酸激酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rb (Ser608) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-human IgG Whole serum 羊抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit 人類風濕因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Thr261) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSPBAP1 熱休克蛋白27相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

T(Mouse Testoterone)ELISA Kit 小鼠睪酮 96T

phospho-PTPN6(Tyr564) 英文名稱： 磷酸化蛋白酪酸磷酸酶1C抗體 0.1ml

CCDC148 英文名稱： 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體 0.2ml

Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Thr261) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪酸激酶2抗原 0.5mg

IGF1R 英文名稱： 胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Centaurin γ1 中心體肌動蛋白γ1抗體(增強型PI3K蛋白) 規(guī)格 0.2ml

Anti- Beta-catenin/ Beta-cats /FITC 熒光素標記 β-連環(huán)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh TIS11D/ERF2 表皮生長因子反應(yīng)蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-HCMV UL23/HHV5 UL23/FITC 熒光素標記人巨細胞病毒UL23抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-fgl2/FITC 熒光素標記凝血酶原酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標記細胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BZW2 BZW2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

B7-H1/PDL1/CD274(programmed death ligand 1) 程序性死亡配體1(多肽) 0.5mg

HCG3 英文名稱： HCG3蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh RNF130/ 環(huán)指蛋白130抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-NFKB p52/NF-κB2 p100/FITC 熒光素標記細胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。