詳細介紹
小鼠腹水瘤細胞;SAC-ⅡC3價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱 小鼠腹水瘤細胞;SAC-ⅡC3價格
形態(tài)特性 圓形
品牌 貼壁生長
特征特性 SAC-IIC2的一個克隆,源自SRS-82細胞株,經(jīng)有限稀釋而得。 該細胞株X-C測試陽性,細胞質(zhì)和細胞表面都有A型和C型病毒顆粒。 染色體數(shù)目是41。細胞中發(fā)現(xiàn)有染色體標記A,B和M。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) /FITC 熒光素標記磷酸化p21激活激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
γ1氨基丁酸受體α1抗體 Anti-GABA-ARα1 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FLNC 英文名稱: 細絲蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SRF (Ser103) 磷酸化生長激素釋放因子抗體(血清應(yīng)答因子) 規(guī)格 0.1ml
Goat Anti-Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
Plg (Rabbit Plasminogen) ELISA Kit 兔子纖溶酶原Multi-class antibodies規(guī)格: 96T
Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標記兔抗大、小鼠細胞表面趨化因子受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DBF4B/ASKL1 S期激酶活化蛋白DBF4B抗體 規(guī)格 0.2ml
Monkey IgG/PE 熒光素PE標記猴IgG 0.1ml
Beta-lactoglobulin 英文名稱: β-乳球蛋白抗體 1ml
Rhesus antibody Rh β-Amyloid 1-42(CT) β淀粉樣肽1-42 (C端)抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-CXCR3/CD183(rat,mo) /FITC 熒光素標記兔抗大、小鼠細胞表面趨化因子受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SUR1 英文名稱: 磺酰脲類藥物受體1抗體 0.1ml
FOXL2 英文名稱: 叉頭蛋白L2抗體 0.1ml
瘦素受體抗體 Anti-Leptin receptor 0.2ml
Anti-RAR- Alpha /FITC 熒光素標記維甲酸受體-α 抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 規(guī)格 0.1ml
Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
E ELISA Kit 大鼠雌激素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FAM135B FAM135B蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96T
MSH2 英文名稱: 錯配修復蛋白2抗體 0.1ml
phospho-Androgen Receptor (Ser515) 英文名稱: 磷酸化雄激素受體抗體 0.1ml
Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml