詳細介紹
參數規(guī)格:
貨號:YS-01P6389
產品規(guī)格:48T 0.1PCR管
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
甲酯 ≥99%, FCC10-十一烯 FG,≥90%小鼠大內皮(Big ET)免疫試劑盒
癸甲酯 Standard for GC ,≥99.5% (GC) 丁位十一內酯 98%小鼠大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)免疫試劑盒
癸甲酯 98%依蘭依蘭油 特級小鼠催乳抑制激(PIH)免疫試劑盒
癸甲酯 分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99.5% (GC) AR,98%小鼠催乳釋放激(PRH)免疫試劑盒
草莓 98% GR,98%小鼠催乳(PRL)免疫試劑盒
肉豆蔻甲酯 98% 40%溶液,電子級小鼠催產(OT)免疫試劑盒
2-甲基丁 98% ≥99.99% metals basis小鼠促有絲分裂因子(MF/MPF)免疫試劑盒
2-甲基丁 天然, ≥98%, Kosher ACS,98%小鼠促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
對甲氧基甲 98%六磷 60%水溶液小鼠促生長激釋放激(GHRH)免疫試劑盒
對甲氧基甲 ≥98%, FCC, FG六鈦,水溶液 60%水溶液小鼠促腎上腺皮質激釋放因子(CRF)免疫試劑盒
乙薄荷酯 98%戊二酐 98%小鼠促腎上腺皮質激(ACTH)免疫試劑盒
十四 Standard for GC,≥99.5% (GC)銅鐵試劑 AR,98.0%小鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
十四 98%銅鐵試劑 CP,95.60%小鼠促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒
十四 分析標準品,≥99.5% (GC銅鐵試劑 SU,98.00%小鼠促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
十四 ≥98%,FCC, FG丁鈉 98%小鼠雌三(E3)免疫試劑盒
牛源性成分核酸檢測試劑盒48T 0.1PCR管鴨白介1(IL-1)ELISA試劑盒,5-戊酰α1,4-N-乙酰葡糖轉移α4Gn-T抗體
顆粒A(Gzms-A)ELISA聯(lián)免疫吸附試劑盒--專賣2-甲基-4-戊烯芳香乙酰脫乙酰基抗體
BOC-Nim-芐基-L-組氨2-(羥甲基)哌啶-1-甲叔丁酯芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?抗體
BOC-L-高丙氨2-(羥甲基)哌啶-1-甲叔丁酯氨基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉移抗體
人前列腺F2α(PGF2α)ELISA試劑盒, PGF2α ELISA2-(羥甲基)哌啶-1-甲叔丁酯賴氨酮戊二還原抗體
人磷肌醇3激(PI3K)ELISA試劑盒,2,4-二甲錨蛋白重復域6抗體
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA試劑盒,2,4-二甲精氨2抗體
人血漿抗凝蛋白C(PC) ELISA試劑盒,3,4-Difluoro-2-Methylbenzoic Acid固酮還原家族1成員C3抗體
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。