詳細介紹
實驗方法步驟:
特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個月。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鯉浮腫病毒(CEV)核酸檢測試劑盒48T
貨號:YS-01P6476
產(chǎn)品規(guī)格:48T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運輸:低溫
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設立一個專用的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
4--7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑 99%檸檬酯 98%人糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
4-硝基-7-哌并氧雜惡二唑 98%2-氨基-4,6-二甲基嘧啶 98%人糖原合成免疫試劑盒
4-肼基-7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑 98%2-氨基-4,6-二嘧啶 98%人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
1,4-哌二乙磺 99%4,6-二甲基-2-巰基嘧啶 98%人糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)免疫試劑盒
哌-N,N-雙(2-羥基烷磺) 99%4,6-二嘧啶 98%人糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)免疫試劑盒
≥98.5% (GC)N,N′-二基-N,N′-(3-基)-1,1′-聯(lián)-4,4′-二(TPD)人糖磷脂酰肌(GPI)免疫試劑盒
對二甲二聚體 99%浴銅靈 98%人糖類抗原72-4(CA72-4)免疫試劑盒
對磷二鈉 98%2-溴芴 97%人糖類抗原50(CA50)免疫試劑盒
5’-磷吡哆,一水 98%浴銅靈 purified by sublimation, 99.99% trace metals basis人糖類抗原19-9(CA19-9)免疫試劑盒
鹽吡哆 99%4,4'-二(9-咔唑)聯(lián) 98%人糖類抗原125(CA125)免疫試劑盒
1,4-哌二乙磺二鈉鹽 BC2,5-二(甲基)- 1-甲氧基-4- (2-乙基已氧基)- 98%人糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1)免疫試劑盒
1,4-哌二乙磺倍半鈉鹽 99%2-溴-9-芴酮 96%人糖化血紅蛋白A1c(A1c)免疫試劑盒
并五 98%9,9-二辛基-2,7-二溴基芴 97%人糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)免疫試劑盒
對磷二鈉 六水合物 培養(yǎng)級, ≥98%9,9-二己基-2,7-二溴芴 97%人糖化白蛋白(GA)免疫試劑盒
對磷二鈉 for enzyme immunoassay,≥99.0%3-癸基噻吩 98%人糖蛋白130(gp130)免疫試劑盒
鯉浮腫病毒(CEV)核酸檢測試劑盒48T倉鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒,2-氨基-4-甲基-5-溴嘧啶BZW2蛋白抗體
豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒,咪唑-4-甲甲酯緩激肽B1受體抗體
豬食欲/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒,咪唑-4-甲甲酯鈣激活通道蛋白α1抗體
豬可溶性P選擇(sP-Selectin)ELISA試劑盒,咪唑-4-甲甲酯卵黃狀黃斑病蛋白2抗體
豬生長激釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒,2-溴-4-甲氧基絲氨/蘇氨蛋白激SAD-B抗體
豬α干擾(IFN-α)ELISA試劑盒,2-溴-4-甲氧基鼻咽癌相關轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體
P27蛋白(P27)ELISA試劑盒--動物,人2-溴-4-甲氧基腦肌激BCK抗體
葡萄糖瓊脂Aliskiren Hemifumarateβ葡萄糖抗體