詳細(xì)介紹
大鼠原代腦膜細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠原代腦膜細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含大鼠原代腦膜細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用大鼠原代腦膜細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱(chēng) | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
面肩肱型肌營(yíng)養(yǎng)不良癥相關(guān)蛋白FRG1抗體 | 白介素32抗體 |
細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 | 調(diào)節(jié)蛋白3抗體 |
生長(zhǎng)分化因子15/巨嗜細(xì)胞抑制因子1抗體 | HCC 94[HCC941122]細(xì)胞,子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 人低分化胃癌細(xì)胞,SGC7901細(xì)胞 豬腎細(xì)胞;PK(15) |
載脂蛋白B受體抗體 | 遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1抗體 |
G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α3抗體 | 趨化因子受體1抗體 |
人小腦顆粒細(xì)胞裂解物HCGCL | EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
親環(huán)素相關(guān)蛋白1抗體 | NIH/3T3小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛血清) |
凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 | CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框173抗體 | 急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 |
甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 | 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體 | CM-R065大鼠腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
NCI-H358 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 大鼠原代腦膜細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基ROR1 Others Human 人 ROR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
Lewis細(xì)胞,小鼠肺癌細(xì)胞 CHL/IU [ CHL-11 ](中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A | 小鼠氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;C918 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1002 |
1.使用大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無(wú)特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響大鼠原代腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。