詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:真核生物18S核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管
貨號:YS-01P6404
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
運(yùn)輸:低溫
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
儲存條件:-20℃以下,有效期12個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)專用的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
月桂鈉 98%辛弗林 98%小鼠CD45分子(CD45)免疫試劑盒
2-硫代 98%丁酐 98%小鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒
間二甲 99.0%醋纖維 乙?;?32.0-34.5 wt %小鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒
2,2'-雙噻吩 98%氧化鎂 AR,98.0%小鼠CD33分子(CD33)免疫試劑盒
3-丁基噻吩 98%氧化鎂 99.99% metals basis小鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒
2-溴-3-己基噻吩 98%氧化鎂 SP小鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒
2-溴-3-十二烷基噻吩 95%納米氧化鎂 50nm,球形,99.9% metals basis小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒
3-噻吩 98%氧化鎂 99%,50nm小鼠cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)免疫試劑盒
2--3-溴噻吩 97%膽紅 98%小鼠Ca-ATP(Ca-ATPase)免疫試劑盒
5,5'-二溴-2,2'-聯(lián)噻吩 99%肝鈉 185 USP units/mg 小鼠B因子(BF)免疫試劑盒
2,3-二溴噻吩 98%胰 USP級小鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
2,5-二溴-3-己基噻吩 97%胃蛋白(豬源) 1:3000小鼠B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫試劑盒
2,5-二溴-3-辛基噻吩 96%L-甲狀腺 98%小鼠B活化因子(BAFF)免疫試劑盒
2,5-二溴-3,4-二硝基噻吩 98%氧化鋁 SP,99.999%小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)免疫試劑盒
2,5-二溴-3-十二烷基噻吩 97% 氧化鋁 99.998% metals basis ,5~6μm,粉末小鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒
真核生物18S核酸檢測試劑盒48T 0.2PCR管大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒,3-溴-4-乙烯去整合樣金屬蛋白28抗體
大鼠碳酐2(CA-2)ELISA試劑盒,3-溴-4-乙烯去整合樣金屬蛋白32抗體
大鼠游離脂肪(FFA)ELISA試劑盒,單硝異山梨酯整合樣金屬蛋白與樣4蛋白抗體
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒,基三乙基膜粘連蛋白9抗體
大鼠脂蛋白磷脂A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒,基三乙基整合樣金屬蛋白與15型抗體
大鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒,4--2-整合樣金屬蛋白與2型抗體
大鼠內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒,4--2-整合樣金屬蛋白與8型抗體
鴨白介8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒,5-吲哚整合樣金屬蛋白與9型抗體
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。