鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF

鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF產(chǎn)品概述：
鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF
英文名稱：Ni Sepharose 6 Fast Flow  

其他名稱：金屬鎳螯合瓊脂糖凝膠6FF；His融合標(biāo)簽蛋白純化樹(shù)脂  

級(jí)別：BR  

基質(zhì)：6%交聯(lián)瓊脂糖凝膠  

配基：Ni2+  

配基密度：20～40umol/ml  

吸附載量：15mg蛋白/ml  

顆粒大?。?5～165um  

最大流速：300cm/h  

PH范圍：3～10，在位清洗時(shí)pH范圍可到2～11  

性狀(以下信息僅供參考)：含20%乙醇，底部為膠體。其原理是利用蛋白質(zhì)表面的一些氨基酸，如組氨酸能與多種過(guò)渡金屬離子如Cu2+，Zn2+，Ni2+，Co2+，F(xiàn)e3+發(fā)生特殊的相互作用，能夠吸附富含這類氨基酸的蛋白質(zhì)，從而達(dá)到分離純化的目的。因此，偶聯(lián)這些金屬離子的瓊脂糖凝膠就能夠選擇性地分離出這些含有多個(gè)組氨酸的蛋白以及對(duì)金屬離子有吸附作用的多肽、蛋白和核苷酸。半胱氨酸和色氨酸也能與固定金屬離子結(jié)合，但這種結(jié)合力要遠(yuǎn)小于組氨酸殘基與金屬離子的結(jié)合力。具有特異性好、流速快的優(yōu)點(diǎn)，顆粒粒度均勻，粒徑小，并且螯合鎳更穩(wěn)定，能耐受更高的還原劑，物理和化學(xué)穩(wěn)定性好  

用途：本品僅供科研，不得用于其它用途。(以下用途僅供參考)分離帶His標(biāo)簽的重組蛋白及能被金屬離子吸附的多肽、蛋白、核苷酸、磷酸化蛋白  

保存：2～8℃  

公司優(yōu)勢(shì)：

我司為專業(yè)的生物試劑公司，不僅代理各種知名的國(guó)際國(guó)內(nèi)品牌，還注重自身的和，具備一定的專業(yè)背景和實(shí)力基礎(chǔ)。我司成立較早，在殘酷的競(jìng)爭(zhēng)環(huán)境中屹立至今，這與我們誠(chéng)信至上以及注重專業(yè)實(shí)力的信念是離不開(kāi)的。經(jīng)過(guò)多年的摸爬滾打，我司擁有屬于自己的營(yíng)銷理念和方法。我司定位明確，客戶精準(zhǔn)，眼光高遠(yuǎn)，立足于當(dāng)下前沿性的科研領(lǐng)域，提供當(dāng)前科研所需的試劑以及耗材產(chǎn)品，客戶遍布各大高校、科研院所以及其他性的企業(yè)。關(guān)于鎳NTA瓊脂糖凝膠6FF訂購(gòu)事宜以及合作詳情可點(diǎn)擊這里咨詢我們。

Western Blot操作方法：
1.培養(yǎng)細(xì)胞蛋白質(zhì)樣品的制備： 
1）在合適的鹽濃度下，應(yīng)保持蛋白質(zhì)的最大溶解性和可重復(fù)性。 
2）選擇合適的表面活性劑和還原劑，破壞所有非共價(jià)結(jié)合的蛋白質(zhì)復(fù)合物和共價(jià)鍵二硫鍵，使其形成一個(gè)各自多肽的溶液。 
3）盡量去除核酸，多糖，脂類等干擾分子。 
4）防止蛋白質(zhì)在樣品處理過(guò)程中的人為的修飾，制備過(guò)程應(yīng)在低溫下進(jìn)行，以避免細(xì)胞破碎釋放出的各種酶類的修飾（建議加入合適的蛋白酶抑制劑）  
5）樣品建議分裝成合適的量，然后冷凍干燥或直接以液體狀態(tài)置-80℃中保存，但要注意不要反復(fù)凍融。  
2.組織樣品的制備：
手術(shù)切除的組織塊迅速置于預(yù)冷的0.95生理鹽水中，漂洗數(shù)次，以清潔表面的血跡，將組織稱量后切成幾個(gè)較小的組織塊放入機(jī)戒組織勻漿器中，按組織凈重，裂解液=1：10的比例，加入相應(yīng)體積的裂解液進(jìn)行勻漿，離心收集上清（如有粘稠物可超聲處理，具體方法見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的樣品制備，也可以冷凍干燥降解核酸后，將凍干的蛋白質(zhì)樣品溶解在適當(dāng)?shù)纳蠘?buffer中，混勻后靜置3小時(shí)使樣品中的蛋白質(zhì)充分的溶解，有5分鐘即可，4度離心收集。）加入Laemmli樣品緩沖液（視蛋白樣品濃度，以1：1或1：2的比例混合）強(qiáng)力混勻，樣品置100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘，10000g離心10分鐘，取上清液，將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中，至此，電泳樣品已準(zhǔn)備就緒（樣品即可立即使用也可也可以分裝凍存，-20℃存放的樣品可穩(wěn)定保持?jǐn)?shù)月。）
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