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線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法

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更新時(shí)間:2022-03-08 15:08:50瀏覽次數(shù):396

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) YS-01S6425 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供于科研使用    
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法公司正在熱銷的產(chǎn)品:cFn人細(xì)胞纖維連接蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
MEPE人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白ELISA檢測(cè)試劑盒
CYP21B人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶ELISA方法
CYP21A人細(xì)胞色素P450c21A/21-羥化酶ELISA方法
CYP450人細(xì)胞色素P450ELISA檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍(lán)綠色之前均可使用。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法

100管/96樣

熒光法

YS-01S6425

商品介紹:

公司產(chǎn)品僅用于科研測(cè)定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來(lái)自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過(guò)程有關(guān)。

正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過(guò)多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。

因此,通過(guò)檢測(cè)活性氧的變化來(lái)判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測(cè)定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過(guò)線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無(wú)熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。

圖片1.png

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測(cè)。

2. 細(xì)菌或細(xì)胞:按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。

3. 血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。

測(cè)定步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預(yù)熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 對(duì)照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

6. 測(cè)定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。

其中標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需做一管,測(cè)定管和對(duì)照管每個(gè)樣均需做。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。

人角膜鎖鏈蛋白(CDSN)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒多主葡萄殼Phospho-ULK1 (Ser638) (D8K9O) Rabbit mAb

人接觸蛋白1(CNTN1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒短密青霉Color-coded Prestained Protein Marker

人接觸蛋白2(CNTN2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉SimpleChIP® DNA Purification Buffers and Spin Columns

人接觸蛋白3(CNTN3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒香菇SGLT2 Antibody

人接觸蛋白4(CNTN4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒黑曲霉Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb (IHC Formulated)

人接觸蛋白相關(guān)蛋白1(CNTNAP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒釀酒酵母N-Cadherin (13A9) Mouse mAb

人接觸蛋白相關(guān)蛋白樣蛋白4(CNTNAP4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒梨輪紋病CYP11A1 (D8F4F) Rabbit mAb

人接頭蛋白2(ELMO2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽孢桿Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Biotinylated)

人結(jié)蛋白(Des)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 草分枝桿Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb

人結(jié)構(gòu)特異性識(shí)別蛋白1(SSRP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒線殼囊孢(座線孢)Caspase-3 (D3R6Y) Rabbit mAb

人結(jié)合珠蛋白(HP)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 百脈根中間根瘤Phospho-Rad50 (Ser635) Antibody

人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 煙色齒耳Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2) (Thr202/Tyr204) (197G2) Rabbit mAb (Biotinylated)

人骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒櫟Phospho-CREB (Ser133) (87G3) Rabbit mAb (PE Conjugate)

人轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(TNPO2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒反硝化鹽單胞SimpleChIP® Chromatin IP Buffers

人線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP-2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒薄層屬UBE2C Antibody
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)熒光法載脂蛋白O抗體Human JAML ELISA Kit旋毛蟲抗體(Trichinella Ab)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人

β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體Human JAKMIP2(Janus kinase and microtubule-interacting protein 2) ELISA Kit2216E瓊脂

共濟(jì)失調(diào)性眼球運(yùn)動(dòng)功能喪失相關(guān)蛋白AOA1抗體Human JAM2 ELISA Kit多粘素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)

三號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框抗體Human KANK2 ELISA Kit血瓊脂基礎(chǔ)   分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶抗體Human KANK2 ELISA Kit細(xì) L型分離瓊脂用于L型細(xì)分離培養(yǎng)

磷酸化水通道蛋白2抗體Human JAM2 ELISA KitL-亮氨酸

ADP核糖基化因子1抗體Human JAML ELISA KitL-精氨酸L-谷氨酸鹽

乙型肝炎病X相關(guān)蛋白2抗體Human JIP1 ELISA Kit人柯薩奇病IgM(Cox V-IgM)ELISA試劑盒,Cox V-IgM ELISA

 


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