詳細(xì)介紹
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:NAD激酶(NADK)可見分光光度法
測(cè)試方法:可見分光光度法
規(guī)格 : 50管/24樣
貨號(hào):YS-01S6324
測(cè)定意義
NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測(cè)定原理:
NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過在600 nm下測(cè)定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
人胱天蛋白酶1(CASP1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒棕褐小單孢Phospho-Stat6 (Tyr641) (D8S9Y) Rabbit mAb (Alexa Fluor®647 Conjugate)
人半胱天冬酶3(CASP3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒猴頭Phospho-NF-kappaB p105 (Ser933) Blocking Peptide
人組織蛋白酶B(CTSB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒FrigoribacteriumPhospho-IKK-alpha/beta (Ser176/180) Blocking Peptide
人組織蛋白酶V(CTSV)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸桿β-Actin Blocking Peptide
人單核趨化蛋白1(MCP-1)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒枯草芽胞桿Phospho-Bad (Ser112) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒菊異莖點(diǎn)霉Phospho-GSK-3α (Ser21) Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 蒼黃鏈霉CD38 (HIT2) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjugate)
人調(diào)節(jié)正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 假單孢IDO (D5J4E™) Rabbit mAb (PE Conjugate)
人單核趨化蛋白3(MCP-3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒大腸埃希氏Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人嗜酸粒趨化因子(ECF/CCL11)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒三葉草根瘤Phospho-IRF-3 (Ser396) (D6O1M) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)
人胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒委內(nèi)瑞拉鏈霉β-Tubulin Blocking Peptide
人巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒紅色紅曲 Cytochrome c Blocking Peptide
人二級(jí)組織趨化因子(SLC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒冬蟲夏草COX IV Blocking Peptide
人巨噬來源的趨化因子(MDC)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒莫哈韋芽孢桿Mre11 Blocking Peptide
人髓樣前體抑制因子2(MPIF2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒海洋桿PU.1 Blocking Peptide
NAD激酶(NADK)可見分光光度法2號(hào)染色體開放閱讀框88抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgG ELISA KitⅡ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體Human OTUD5(OTU domain containing 5) ELISA Kit促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
激活素受體1B抗體Human MARK2 ELISA KitCBZ-L-丙氨酸
雄受體相關(guān)蛋白24抗體Human MARK3 ELISA Kit小鼠心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒,
淀粉樣肽前體蛋白抗體(C端)Human MARK1 ELISA KitEB病IgM(EBv IgM)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
腺苷酸環(huán)化酶2抗體Human MARK4 ELISA Kit糖皮質(zhì)受體α(GR-α)ELISA試劑盒--動(dòng)物,人
載脂蛋白C3抗體Human MARS ELISA Kit小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒,
載脂蛋白E4抗體Human MARVELD2 ELISA Kit小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒,
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。