大鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞 Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞) 內(nèi)膜上皮細(xì)胞 COLO 205 人結(jié)腸癌細(xì)胞 MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞 Human 小鼠原代胰腺星狀細(xì)胞

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自大隱靜脈；大隱靜脈起于足背靜脈弓內(nèi)側(cè)端，經(jīng)內(nèi)踝前方，沿小腿內(nèi)側(cè)緣伴隱神經(jīng)上行，經(jīng)股骨內(nèi)側(cè)髁后方，進(jìn)入大腿內(nèi)側(cè)部，與股內(nèi)側(cè)皮神經(jīng)伴行，逐漸向前上，在恥骨結(jié)節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔，匯入股靜脈，其匯入點稱為隱股點。有5條屬支：旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內(nèi)側(cè)淺靜脈和股外側(cè)淺靜脈，它們匯入大隱靜脈的形式多樣，相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結(jié)扎時，須分別結(jié)扎、切斷各屬支，以防復(fù)發(fā)。大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞對維持大隱靜脈動態(tài)平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統(tǒng)的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調(diào)節(jié)因子；大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞還釋放控制細(xì)胞增殖和調(diào)節(jié)血管壁緊張度的分子。

產(chǎn)品名稱：大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

組織來源：大隱靜脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠大隱靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA 試劑盒

Human visceral adipose specific serine protease inhibitor (vaspin) ELISA Kit 人內(nèi)臟脂肪特異性絲蛋白酶抑制劑(vaspin)試劑盒

Humanpan-cytokeratin,P-CKELISAKit 人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineapigGrowthhormone,GH試劑盒豚鼠生長激素(GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次

Mousec-fosELISAKit小鼠c-fos試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠膽囊收縮素A受體(CCKAR)試劑盒 ，英文名： CCKAR ELISA Kit

Human cadherln related neuronal receptor 1 (C-1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)試劑盒

rabbitProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 兔子前列腺素E2(PGE2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforB7-2/sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86

線蟲甲基磺酸甲酯(MMS)誘導(dǎo)突變試劑盒10次

rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISAKit兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人周期素依賴性激酶5(CDK-5)試劑盒   96T/48T

人周期素依賴性激酶4(CDK-4)試劑盒   96T/48T

人周期素依賴性激酶2(CDK-2)試劑盒   96T/48T

人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒   96T/48T

CEACAM1重組人 CEACAM1 / CD66a 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

硫酸皮膚素差向異構(gòu)酶(DSE)重組蛋白 Recombinant Dermatan Sulfate Epimerase (DSE)

TPK1重組人 TPK1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ALDH7A1 Protein Human 重組人 ALDH7A1 / ATQ1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

M1 Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human  二氫還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr- 食管癌細(xì)胞，TE-11細(xì)胞 B82細(xì)胞，鼠細(xì)胞系  人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A  AAV-293細(xì)胞，人人胚腎細(xì)胞 大鼠心肌細(xì)胞,H9c2(2-1) 豬原代皮膚成纖維細(xì)胞 大鼠原代腎近端小管上皮細(xì)胞

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)human 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(人源)

CHN1 Protein Human 重組人 CHN1 / Chimerin 1 蛋白

WFDC2重組狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CHL1 Protein Mouse 重組小鼠 CHL-1 蛋白

TRIB2重組人 TRIB2 / TRB2 蛋白 Protein