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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮采用混合膠原酶消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，細胞純度可達90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮原代細胞 | 組織來源 | 骨 |
英文名稱 | Rat Femoral Head Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X8230 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細胞分離自骨組織；股骨頭（caput femoris）呈圓形，約占一圓球的2/3，其上為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋，在其頂部微后有一小窩，稱為股骨頭凹，為股骨頭韌帶附著處，股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀，后毛細血管微動脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞；骨微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯，與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切，參與了許多骨的病理生理過程在骨吸收新骨的形成血管再生營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液：0.25%，Accutase
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠解偶聯(lián)蛋白1(UCP1)ELISA 試劑盒
Rat ai cardiolipin aibody IgM (ACA-IgM) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒
HumanCalreticulin,CELISAKit 人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒 進口分裝
Humanai-calmodulinspecificaibody,CaM-ab試劑盒人抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)試劑盒
植物核同糖1,5二0酸羧化/加氧酶(RUBPCase/Rubisco)加氧活性定量試劑盒20次
Humanα-glathioneS-ansferases，α-GSTELISAKit人αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)試劑盒
小鼠心肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Gao Min rat thyroxine (u-T4) ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒
HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 人透明質(zhì)酸酶(HAase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AG試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞BAX蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物K1(VK1)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物E(VE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D3(VD3)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
植物D2(VD2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
CD226重組大鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 Protein
ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1 0.5mgECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原
CDC42BPB重組人 CDC42BPB 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白
MSR1 Protein Mouse 重組小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 蛋白 (His 標簽)
Balb/c小鼠骨髓間質(zhì)干細胞 Balb/c mouse bone marrow mesenchymal stem cells HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 NRN1 Others Human 人 NRN1 / Neuritin 羊原代腎小管上皮細胞 人原代腦膠質(zhì)瘤成纖維細胞
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮原代細胞MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells 0.5mgMTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱：MYC 致癌基因(抗原)
AHSP Protein Human 重組人 AHSP / ERAF 蛋白
HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標簽)
SIRT1重組人 SIRT1 / SIR2L1 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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