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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠頜下腺上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠頜下腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠頜下腺上皮原代細胞 | 組織來源 | 頜下腺組織 |
英文名稱 | Rat Submandibular Gland Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7079 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
大鼠頜下腺上皮細胞分離自頜下腺組織；頜下腺是下頜部的唾液腺，左右各一個。頜下腺屬于唾液腺的一種，主要的功能就是分泌唾液。機體共有三大唾液腺，包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方，接近下頜骨彎曲角附近，所以也叫下頜下腺（下頜骨下方的唾液腺），左右各一，由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管，主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細胞是一種高度分化的上皮細胞，在體外難以長期存活和保持分化狀態(tài)；頜下腺的主要病理變化有：①頜下腺炎；②頜下腺囊腫；③頜下腺腫；④頜下腺結(jié)石。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒
Rat aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
Humanprogesteronereceptor,PGRELISAKit 人孕酮受體(PGR)試劑盒 進口分裝
HumanChorionicGonadoophin,HCG試劑盒人絨毛膜(HCG)試劑盒
總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次
HumanSalmonellatyphiaigen,St-AgELISAKit人傷寒抗原(St-Ag)試劑盒
豬促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA 試劑盒
Human macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 人巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒
PorcineDexamethasone,DexELISAKit 豬(Dex)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha1Beta-GP(HumanAlpha1Betaglycoprotein)ELISAKit人α1β糖蛋白
血液0酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量試劑盒10次
MouseαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)試劑盒
脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白 英文名稱： fatty acid-binding protein 規(guī)格： 英文縮寫： FABP4
凋亡相關(guān)因子Fas/Apo-1 英文名稱： apoptosis-inducing factor Fas/Apo-1 規(guī)格： 英文縮寫： Fas/Apo-1
凋亡相關(guān)因子配體 英文名稱： apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格： 英文縮寫： Fas-L
凋亡相關(guān)因子配體 英文名稱： apoptosis-inducing factor ligand 規(guī)格： 英文縮寫： Fas-L
FAS重組食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 Protein
IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I 0.5mgIGF-I( Insulin-like Growth Factor-I ) 胰島素樣生長因子-I(抗原)
MUSK重組人 MUSK Kinase 蛋白 (aa 433-783, His & GST 標簽) Protein
IVD Protein Human 重組人 Isovaleryl-CoA dehydrogenase / IVD 蛋白 (aa 30-423, His 標簽)
PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白 (Fc 標簽)
Ca Ski, 人細胞 非洲綠猴腎細胞,CV-1(M)細胞 PA-1(人卵巢畸胎瘤細胞) SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細胞裂解液 5637, 人膀胱癌細胞 蓖麻蠶卵細胞,NISE-Sacy-12細胞 TE 353.Sk(人正常皮膚細胞) MouseS 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞 大鼠原代肝卵圓細胞
大鼠頜下腺上皮原代細胞CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原 0.5mgCD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗原
ACYP1 Protein Human 重組人 ACYP1 / Acylphosphatase-1 蛋白 (GST 標簽)
CDH5重組小鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His 標簽) Protein
EPHA3 Protein Rat 重組大鼠 EphA3 蛋白
STK24重組人 STK24 / MST3 蛋白 (His 標簽) Protein
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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