大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：雞原代小腸黏膜上皮細(xì)胞 JAR(人胎盤(pán)絨毛膜癌細(xì)胞) 769-P 人癌細(xì)胞 1ml/T75 MT-4 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 A172 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 小鼠原代骨髓單個(gè)核細(xì)胞

大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞

大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明，角膜并沒(méi)有血管，透過(guò)外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜的高度透明性和光學(xué)性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一，而角膜內(nèi)皮細(xì)胞（CEC）在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜內(nèi)皮細(xì)胞是角膜內(nèi)層的單層細(xì)胞，構(gòu)成了后彈力層和房水之間的物理屏障，通過(guò)離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分，維持角膜的半脫水狀態(tài)，保證角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜內(nèi)皮細(xì)胞功能出現(xiàn)紊亂，常導(dǎo)致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細(xì)胞主要功能有：①角膜是的無(wú)血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能；②角膜內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)角膜透明性有重要作用；③角膜內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)Na+-K+-ATP酶活性，維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度，防止水分滲入角膜內(nèi)，維持角膜實(shí)質(zhì)層相對(duì)脫水狀態(tài)，維持透明性。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞

組織來(lái)源：眼角膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮采用混合膠原酶消化結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠角膜內(nèi)皮經(jīng)NSE（神經(jīng)元特異性烯醇化酶）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

豚鼠白介素22(IL-22)試劑盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)試劑盒

RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-EP(RabbitBeta-Endorphin)ELISAKit兔子β內(nèi)啡肽

細(xì)菌樣品二維電泳裂解液用于細(xì)菌蛋白二維電泳

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 ，英文名： SOD ELISA Kit

Human polymorphonuclear leukocyte elastase (PMN Elastase) ELISA Kit 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMN Elastase)試劑盒

rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBetaGD(MouseBeta-glucuronidase)ELISAKit小鼠β葡萄糖酸苷酶

細(xì)菌纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次

RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit兔子高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒試劑盒   人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒   人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒、人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒、人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

FGF1重組人 aFGF / FGF1 蛋白 Protein

結(jié)合球蛋白(CBG)重組蛋白 Recombinant Corticosteroid Binding Globulin (CBG)

SMR3B重組人 SMR3B 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CDK1 Protein Human 重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

PLA2G12B重組小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白

USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

LTBR Protein Rat 重組大鼠 LTBR / ???

大鼠角膜內(nèi)皮原代細(xì)胞CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1 0.5mgCREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(抗原)

AK1 Protein Human 重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD274重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

NTRK3 Protein Mouse 重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi)；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。