大鼠膀胱移行上皮原代細(xì)胞

大鼠膀胱移行上皮原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：人原代臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 OVCAR-3(人癌細(xì)胞) HDMEC 人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞 1ml/T75 16HBE 人支氣管上皮細(xì)胞 HCC1937 人癌細(xì)胞 兔原代乳腺成纖維細(xì)胞

大鼠膀胱移行上皮原代細(xì)胞

大鼠膀胱上皮細(xì)胞分離自膀胱組織；膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官，在哺乳類動(dòng)物，它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成，稱為逼尿肌，逼尿肌收縮，可使膀胱內(nèi)壓升高，壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌，形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口，防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌）和黏膜層（極薄的一層移行上皮組織）。其主要作用有：①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子；③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞，進(jìn)而影響腎臟病變。

產(chǎn)品名稱：大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞

組織來(lái)源：膀胱組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡(jiǎn)介

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠膀胱移行上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠膀胱移行上皮經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)試劑盒

Rat apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒

Humanai-toxoplasmaIgMaibody,ai-toxIgMELISAKit 人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanHeatShockProtein90,HSP-90試劑盒人熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒

組織副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次

HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)試劑盒

小鼠2(VD2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒

Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgG試劑盒雞流行性乙型腦抗體IgG(JEIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次

Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)

ABL1重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

INS Protein Human 重組人 Insulin / INS 蛋白

DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

CL-0361HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)  人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus  GBC-SD細(xì)胞，膽囊癌細(xì)胞 人細(xì)胞系,WI-38細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2  大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6  SEMA6A Others 小鼠原代衛(wèi)星膠質(zhì)細(xì)胞 大鼠原代鼻腔粘膜上皮細(xì)胞

大鼠膀胱移行上皮原代細(xì)胞FRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白 1mgFRA1/FOSL1 peptide FRA-1多肽蛋白

ADIPOQ Protein Human 重組人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白

CD59重組大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 蛋白  Protein

JAM2 Protein Mouse 重組小鼠 JAM-2 / JAM-B 蛋白

EPOR & CD131重組人 EPOR & CD131 Homodimer 蛋白 Protein