詳細介紹
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細胞
大鼠視網(wǎng)膜節(jié)細胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、節(jié)細胞層、纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力強。視網(wǎng)膜節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,部分細胞聚集成團,細胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,有些細胞膜上伸出短而小的突起;該細胞為高度分化細胞,在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,視網(wǎng)膜節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷,研究視網(wǎng)膜節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究。
英文名稱 | Rat Retinal Ganglion Cells | 組織來源 | 視網(wǎng)膜組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7392 |
細胞形態(tài) | 元細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞
組織來源:視網(wǎng)膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜節(jié)采用-膠原酶聯(lián)合消化法,結(jié)合視網(wǎng)膜節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜節(jié)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
大鼠重肽絲蛋白(NEFH)試劑盒 ,英文名: NEFH ELISA Kit
Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗粒細胞核周抗體(pANCA)試劑盒
MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰島素受體β
微型RNA(miRNA)擴增試劑盒20次
ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬細胞性蛋白3β
小鼠Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat alpha fetoprotein / alpha fetoprotein (AFP) ELISA Kit 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human16-αHydroxyesogen1,16-αOHE-1試劑盒人16α羥基雌同1(16-αOHE-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseAquaporin2,AQP-2ELISAKit小鼠水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠CD3分子試劑盒 小鼠CD3分子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠CD3分子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠CD3分子試劑盒、小鼠CD3分子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠β-防御素試劑盒 小鼠β-防御素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠β-防御素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
小鼠肝病毒試劑盒 小鼠肝病毒試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠肝病毒試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠肝病毒試劑盒、小鼠肝病毒試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬流感病毒A試劑盒 豬流感病毒A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬流感病毒A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬流感病毒A試劑盒、豬流感病毒A 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
PDGFRA重組大鼠 PDGFRa / CD140a 蛋白 Protein
CYP450(Cytochrome P450 monooxygenase 0.5mgCYP450(Cytochrome P450 monooxygenase) 細胞色素P450單氧化酶(多肽抗原)
CCL21重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白 Protein
CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & GST 標簽)
SERPINA11 Protein Mouse 重組小鼠 SerpinA11 蛋白
CTLL-2細胞,T細胞 人胰腺癌細胞,JF-305細胞 CM-M016小鼠胰腺星狀細胞FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 RSC, 大鼠雪旺細胞 NCYC 234[IPAZSC 148]細胞 COS-7(SV40 小鼠原代破骨細胞 兔原代牙髓干細胞
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細胞chloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白 2mgchloramphenicol/BSA 偶聯(lián)牛血清白蛋白
CTRC Protein Human 重組人 CTRC / chymotrypsin C 蛋白
TNFRSF17重組小鼠 TNFRSF17 / BCMA 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SIGIRR Protein Mouse 重組小鼠 SIGIRR / TIR8 蛋白 (His & Fc 標簽)
PGA4重組人 PGA4 / Pepsinogen A 蛋白 Protein