詳細(xì)介紹
大鼠外周血淋巴原代細(xì)胞
大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞(lymphocyte)是白細(xì)胞的一種,是體積小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識(shí)別功能的細(xì)胞系,按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T淋巴細(xì)胞(又名T細(xì)胞)、B淋巴細(xì)胞(又名B細(xì)胞)和自然殺傷(NK)細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,它們的初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后,T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,參與細(xì)胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等;而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞,再分化為漿細(xì)胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié);NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),具有殺傷靶細(xì)胞的作用。
英文名稱 | Rat Peripheral Blood Lymphocyte Cells | 組織來源 | 血液組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7721 |
細(xì)胞形態(tài) | 圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱:大鼠外周血淋巴細(xì)胞
組織來源:血液組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴經(jīng)過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
大鼠脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)試劑盒 ,英文名: LCN1 ELISA Kit
Mouse soluble myosin heavy chain 2 (sMHC-2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒
MouseFractalkine,FKELISAKit 小鼠趨化因子(FK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanHomocysteine(Hcy)ELISAKit人血漿同型半胱
B2比色法定量試劑盒20次
ELISAKitKAF大鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子
小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thrombin receptor () ELISA Kit 人受體()試劑盒
Humansmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISAKit 人抗小核糖核蛋白/Sm抗體(sNP/Sm)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Hamstehyroxine-BindingGlobulinAssay,TBG試劑盒倉鼠甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母氧化酶活性測定試劑盒20次
MouseBeta-naphthol,β-NphELISAKit小鼠β萘酚(β-Nph)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性瘦素受體(sLR)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)試劑盒 96T/48T
SERPINA6重組小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 Protein
ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(抗原)
FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標(biāo)簽)
LAMP1 Protein Rat 重組大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0 癌細(xì)胞,MDA-MB-453細(xì)胞 GIK細(xì)胞,草魚腎細(xì)胞系 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1036 MCF7細(xì)胞,癌細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,QGY-7701細(xì)胞 T-108B膠原酶 小鼠原代腦膜細(xì)胞 人原代陰道平滑肌細(xì)胞
大鼠外周血淋巴原代細(xì)胞STAT5(signal transducers and activators of transduction5 0.5mgSTAT5(signal transducers and activators of transduction5) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原
FZD10 Protein Human 重組人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白
TBCB重組人 TBCB 蛋白 Protein
SLITRK1 Protein Human 重組人 SLITRK1 蛋白
YWHAB重組人 14-3-3 beta / YWHAB 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein