大鼠微血管周原代細胞

大鼠微血管周原代細胞

大鼠微血管周細胞分離自微血管組織；周細胞（pericyte）又稱Rouget細胞和壁細胞，是一種包圍全身毛細血管和靜脈中內(nèi)皮細胞的細胞，可以收縮。周細胞嵌入毛細血管內(nèi)皮細胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細胞進行細胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細胞的成熟過程。此外，周細胞還具有調控毛細血管血流量、細胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點之一，所以對血管周細胞的生物學特征、標記物、細胞功能等的研究都為相關研究提供基礎資料。周細胞產(chǎn)生手指狀的外延以調控毛細血管的血流量。周細胞和內(nèi)皮細胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細胞連接，包括多種整合素、鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細血管直徑的雙向調控；毛細血管受損時，周細胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細胞和成纖維細胞。

產(chǎn)品名稱：大鼠微血管周細胞

組織來源：微血管組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠血管周采用膠原酶-蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠微血管周經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

大鼠脂肪酸轉運蛋白5(FATP5)試劑盒 ，英文名： FATP5 ELISA Kit

Mouse soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 小鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒

MouseIerferonγ,IFN-γELISAKit 小鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit人高遷移率族蛋白B1

B6高效液相色譜法定量試劑盒20次

ELISAKitCT大鼠降鈣素

小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒

Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒

HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒 進口分裝

Humanai-thrombieceptor,A試劑盒人抗受體(A)試劑盒

植物線粒體核糖體分離試劑盒10次

HumanichinellaaibodyELISAKit人旋毛蟲抗體(ichinellaAb)試劑盒

小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒   96T/48T

小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)試劑盒   96T/48T

小鼠淋巴細胞因子試劑盒   96T/48T

小鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒   96T/48T

PPIL2重組人 PPIL2 蛋白 (aa 280-457, His 標簽) Protein

Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3 0.5mgSocs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗原

B4GALT1重組人 B4GALT1 / GGTB2 蛋白 Protein

CPVL Protein Human 重組人 CPVL / Carboxypeptidase 蛋白

PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標簽)

DogL1 狗肺成纖維樣細胞  TNFRSF1B Others Mouse 小鼠 TNFRSF1B / TNFR2 / CD120b 人細胞裂解液   CDC37 Others Mouse 小鼠 CDC37 / CDC37A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液   VSIG2 Others Human 小鼠原代毛囊干細胞 小鼠原代脾基質細胞

大鼠微血管周原代細胞SM-MHC(Cardiac myosin heavy chain 0.5mgSM-MHC(Cardiac myosin heavy chain) 心肌肌凝蛋白多肽

CSF3 Protein Human 重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

SLPI重組人 SLPI 蛋白 Protein

NRP1 Protein Human 重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標簽)

EPCAM重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 Protein