大鼠牙齦成纖維原代細胞

大鼠牙齦成纖維原代細胞公司出售的產(chǎn)品：小鼠原代乳腺上皮細胞 AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) K562 人慢性骨髓性白血病細胞系 1ml/T75 MLTC-1 小鼠間質(zhì)細胞瘤細胞 IEC-6 大鼠小腸引窩上皮細胞 人原代滑膜細胞

大鼠牙齦成纖維原代細胞

大鼠牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

產(chǎn)品名稱：大鼠牙齦成纖維細胞

組織來源：牙齦組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)試劑盒 ，英文名： IGFBP6 ELISA Kit

Mouse endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒

MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCyclin-D3ELISAKit人細胞周期素D3

細胞AURORA-A激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitON大鼠骨粘連蛋白

小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human asialoglyco protein receptor (ASGPR) ELISA Kit 人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)試劑盒

HumanHemoglobinC,HbCELISAKit 人血紅蛋白C(HbC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40試劑盒人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物(AMYLASE)總活性熒光定量試劑盒20次

MonkeyHyaluronicacid,HAELISAKit猴透明質(zhì)酸(HA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脫脂奶粉   100g

Skimmilk   500g

超氧化物歧化酶   30KU

SOD   3KU

CNDP2重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Argireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3 1gArgireline peptide 抗皺寡肽-1/六勝肽-3/阿基瑞林/乙酰六勝肽-3

GNGT1重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GAD1 Protein Human 重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ACVR1 Protein Rat 重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白

EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細胞 Rattus  Li-7 人肝癌細胞  人胰腺腺泡上皮癌;HPAC  MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15+15%FBS  人表皮角質(zhì)細胞-新生兒(HEK-n) 小鼠原代脊髓微血管內(nèi)皮細胞 人原代肺成纖維細胞

大鼠牙齦成纖維原代細胞Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag標(biāo)簽多肽

FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白

EFNB3重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein

FETUB Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白

CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。