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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的雞肺動脈平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的雞肺動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 雞肺動脈平滑肌原代細胞 | 組織來源 | 肺動脈組織 |
英文名稱 | Chicken Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells | 貨號 | YS-01X7010 |
產品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
雞肺動脈成纖維細胞分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經肺門入肺。肺動脈干位于心包內，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持肺動脈的正常形態(tài)；合成和釋放細胞外基質；組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
Tsu-Pr1細胞，非雄激素依賴型前列腺癌 人子宮內膜腺癌細胞,KLE細胞 心臟微血管內皮細胞cDNAHCMEC cDNA | NF-KapB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亞基p65親和肽 96T |
ROR alpha： 維相關孤兒受體α抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh Cy5 Cy5標記的兔抗親和素 規(guī)格 0.1ml |
Anti-H2AX/FITC 熒光素標記組蛋白H2AX抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | C1orf220： 1號染色體開放閱讀框220抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BTBD7 BTB/POZ結構域蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-C-REL/FITC 熒光素標記淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
死亡受體4抗體 Anti-DR4/APO2/TRAILR1 0.1ml | Aspartate Aminotransferase： 谷草轉酶抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;VERO | C57BL/6小鼠脂肪間質干細胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells |
FBM細胞，胎兒骨髓間充質細胞 嬰兒雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406 | U14(小鼠子細胞) 5×106cells/瓶×2 |
彈(含10mL酶解緩沖液) 1mL | IL2 Protein Human 重組人 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白 |
膽道癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | CL-0020Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒構建穩(wěn)定株)人原位胰腺腺癌細胞 BxPc-3-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin | 雞肺動脈平滑肌原代細胞C1orf220： 1號染色體開放閱讀框220抗體 0.2ml |
大鼠腎小管上皮細胞RRTEpiC | Hep3B2.1-7細胞，人肝癌細胞 人髓母細胞瘤細胞,D341Med細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24 |
HFT-8810(人胎兒胸腺細胞株) 5×106cells/瓶×2 奇異變形桿菌 | IL21 Protein Canine 重組狗 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 |
CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2 | IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh H1N1 matrix protein 2 甲型流感病毒M2抗體 規(guī)格 0.2ml | 人臍動脈平滑肌細胞總RNAHUASMC NA |
ETS1 associated protein II： ETS1相關蛋白2抗體 0.1ml | Anti-Lingo-1 Nogo受體反應蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
HSP-70(Mouse Heat Shock Protein 70) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白70Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | 非洲綠猴腎細胞;VERO |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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